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《固相萃取_气相色谱_质谱联机分析蜂蜜中的氯霉素残留量》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、2004年4月北京师范大学学报(自然科学版)Apr.2004第40卷第2期JournalofBeijingNormalUniversity(NaturalScience)Vol.40No.2固相萃取-气相色谱-质谱联机3分析蜂蜜中的氯霉素残留量•刘宜孜谢孟峡韩杰刘媛邱月明丁雅韵张雷(北京师范大学分析测试中心,100875,北京∥第一作者23岁,女,硕士生)摘要利用固相萃取气相色谱质谱联机分析蜂蜜中的氯霉素残留量.对氯霉素在固相萃取柱上的保留行为进行了研究,优化固相萃取条件,发现不同浓度的氯霉素在硅胶柱和C18柱上的回收率均在90%以上,蜂蜜加标的回收率为8
2、0%～95%,相对标准偏差为7.2%～18.2%,最低检出-1限为0.1μg·kg.对氯霉素的三甲基硅烷化衍生物采用选择离子的模式进行检测(m/Z=466,-1468,470),衍生物的峰面积与样品质量浓度在0.55～220μg·L范围内呈良好的线性关系,线性回归系数为0.9998.关键词氯霉素;气相色谱质谱联机;固相萃取;蜂蜜+分类号O657.63;O658.2;R978.73氯霉素(chloramphenicol)又名左旋霉素,是一类广谱抗生素,作为药物常用于家禽疾病治疗和预防.氯霉素对人的造血系统、消化系统具有严重的毒性反应,有可能引发人的再生障碍[
3、1]性贫血,因此欧盟等国家规定蜂蜜及其他动物源食品中氯霉素的最高残留量不得超过0.1-1μg·kg.动物组织、体液、牛奶、鸡蛋等基体中氯霉素的检测方法已有一些报道,应用较多的有[124]气相色谱法、气相色谱质谱联机、液相色谱法和液相色谱质谱联机等.但多数检测方法的-1最低检出限都达不到0.1μg·kg,以蜂蜜为基体的氯霉素检测方法的相关报道更少.近年来[526]固相萃取方法在对复杂基体样品预处理方面得到了广泛应用.本文对蜂蜜样品的净化和富集方法进行了较为系统的研究,考察了氯霉素在硅胶和C18固相萃取柱上的保留行为,测定了不同浓度的氯霉素在固相萃取柱上的回收
4、率,建立了固相萃取气相色谱质谱联机分析蜂蜜-1中氯霉素的方法,其最低检出限为0.1μg·kg,相对标准偏差符合痕量残留物检测的要求.1实验部分1.1仪器和试剂气相色谱质谱联用仪(TraceGC2MS,美国Thermo2Quest,Finningan公司),色谱柱:DB25MS石英毛细管色谱柱,30m×0.25mm,膜厚0.25μm(J&WScientific,Folsom,-1CA,USA).色谱条件:载气为高纯He,流量1mL·min;不分流进样,进样量1.0μL;进样口温-1度250℃;温度梯度:100℃(1min)→30℃·min→280℃(3min
5、).质谱条件:负CI化学电离源(反应气为甲烷),源温150℃;传输线温度250℃;检测电压500V;选择离子收集模式(收集m/Z为466,468,470的3种碎片离子).所用溶剂和试剂均为分析纯或色谱纯,氯霉素标准品(美国sigma公司),双三甲基硅基三3国家科技攻关计划资助项目(2001BA804A18)•联系人收稿日期:2003210223第2期刘宜孜等:固相萃取-气相色谱-质谱联机分析蜂蜜中的氯霉素残留量233氟乙酰氨(BSTFA,含φ=1%三甲基氯硅烷,美国SupelcoPark公司).固相萃取柱:C18小柱,LC218500mg,容积6mL(美国
6、SupelcoPark公司),硅胶柱,SI21500mg,容积6mL(美国Phenomenex公司).1.2样品处理-11.2.1样品中氯霉素的提取称取5g蜂蜜于50mL离心管中,加入10mL50mmol·L磷酸缓冲液(pH=6.88)、3g无水硫酸钠,旋涡混合.用30mL乙酸乙酯分3次提取.收集提取液,在55℃水浴下旋蒸掉大部分溶剂,剩余的溶剂用氮气吹干,待上样.1.2.2固相萃取净化样品6mL硅胶小柱依次用5mL乙腈、5mLV(二氯甲烷)∶V(正己烷)=1∶1混合液活化;500μL二氯甲烷溶解1.2.1节中的残留物后上样;5mLV(二氯甲烷)∶V(正己
7、烷)=1∶1的混合液淋洗,弃去淋洗液;用5mLφ=20%的乙腈水溶液洗脱,洗脱液用3mL乙酸乙酯分3次提取,合并提取液并吹干,用5mLφ=5%的乙腈水溶液溶解残留物,待C18柱进一步净化.6mLC18小柱依次用5mL乙腈、5mL水活化,上样,5mL水淋洗,弃去淋洗液,5mL乙腈洗脱,吹干洗脱液,待衍生化.1.2.3萃取物的衍生化在上述处理好的残渣中加入100μL衍生试剂,密封后70℃水浴衍生1h;衍生完毕,氮气吹干多余的衍生试剂,用正己烷定容至0.5mL,待GC2MS分析.1.3标准溶液的配置及标准曲线的测定氯霉素标准溶液的配制:准确称取100mg左右氯霉
8、素,用甲醇定容至100mL,取该溶液100μL稀释至10mL作为工
