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1、内江师范学院学报第25卷第2期·38·JOURNALOFNEIJIANGNORMALUNIVERSITYNo.2Vol.25南瓜多糖的提取及纯化33陈玉玲,张宜英,王碧(内江师范学院化学与生命科学学院,四川内江641100)摘要:为开发和利用南瓜多糖,采用纤维素酶法提取南瓜多糖;利用单因素试验考察了纤维素酶的浓度、时间、温度、pH值对南瓜多糖提取率和纯度的影响,并通过紫外光谱和红外光谱对样品进行了分析.结果表明:该法提取南瓜多糖的最佳反应条件为:酶浓度015%,时间120min,温度50℃,pH值512.在最佳条件下,南瓜多糖的提取率为419%,多糖的纯度为52%.
2、紫外光谱分析表明:样品在217nm有多糖的吸收峰,未见蛋白质(280nm)与核酸(260nm)的特征吸收峰,红外光谱分析发现典型多糖吸收峰.关键词:南瓜;多糖;提取;纯化;纤维素酶中图分类号:S56619文献标志码:A文章编号:1671-1785(2010)02-0038-040前言提取南瓜多糖操作简便,但由于水作为溶剂难以完全溶出其中的某些多糖物质,所以需要多次浸提,操作时间长,收率多糖(polysacharides简写为PS)又称多聚糖,是一种具低.近年赵二劳等发现用超声波提取南瓜多糖可大大缩短提有广泛生物活性的大分子,不仅是生物的营养成分,而且还[7]取时间,
3、但其提取率不高.参与多种生命活动.在过去相当长的时间里,大多将其作为一种实验废弃物,是资源的极大浪费.随着人们对传统中药采用酶法提取,反应条件温和,是一种较为先进有效的[8][9]的不断深入研究,从上世纪70年代开始,陆续有一批活性多提取方法.本工作在文献的基础上,采用纤维素酶法从糖成分被发现.近些年,随着生活水平的不断提高,人们的保成熟老南瓜中提取水溶性粗多糖.通过单因素试验考察了纤健意识在逐渐增强,多糖作为保健食品的主要成分已悄然兴维素酶浓度、提取时间、提取温度、pH值对南瓜多糖提取率[1][2]起,有学者说:21世纪的前20年是多糖的时代.的影响,粗多糖经双氧
4、水法脱色,再利用蛋白酶与Sevage南瓜是葫芦科南瓜属中一年生蔓性草本植物,传统中医法[10]相结合脱蛋白,南瓜多糖的提取率为419%,多糖的纯理论认为,中国南瓜性味甘温,入脾胃二经,具有补中益气,度为52%.紫外光谱分析表明在217nm有多糖的特征吸收[3]消炎止痛,解毒杀虫等功效.现代研究表明,南瓜有降低血峰,但未见蛋白质(280nm)与核酸(260nm)的特征吸收峰,红脂、调节血糖等多种生理功能,南瓜产品的开发日益受到世[11212]外光谱分析发现典型多糖吸收峰.界发达国家的重视,已被视为特效保健食品,其开发前景十[4]分诱人.1实验部分植物多糖提取法有多种,
5、如溶剂提取法、酸提法、碱提法1.1材料和仪器等.南瓜多糖(pumpkinpolysaccharide,PP)是植物多糖中的材料和试剂:成熟老南瓜(四川内江桂湖街农贸市场购一种,已见报道的南瓜多糖的提取采用传统的热水浸提法较[5]买);纤维素酶(上海伯奥生物科技有限公司);葡萄糖、95%多,1999年孔庆胜等曾用热水法提取南瓜多糖,并用纸层乙醇、正丁醇、三氯甲烷、丙酮、氢氧化钠、苯酚、浓硫酸、30%析法分析了南瓜多糖的成分,发现南瓜多糖由D-葡萄糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖、木糖和D-葡糖醛酸组成.2002H2O2、柠檬酸、柠檬酸三钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、无水年张
6、拥军等[6]曾用热水法提取,有机溶剂分步萃取,再用乙乙醚:AR(成都科龙化工试剂厂).醇沉淀法沉淀提取南瓜多糖,但其提取率仅为216%.水法试液的配制:用柠檬酸和柠檬酸三钠水溶液分别配制3收稿日期:2009210221基金项目:四川省科技厅应用基础项目(04JY029—022)作者简介:陈玉玲(198—),女,四川巴中人,内江师范学院2006级学生.通讯作者:王碧(1964—),女,四川渠县人,内江师范学院教授,博士.2010年2月陈玉玲,张宜英,王碧:南瓜多糖的提取及纯化·39·pH为312～810的不同pH值缓冲溶液;配制100mg/L的为512,控制纤维素酶浓
7、度为015%,分别在30,40,45,50,葡萄糖标准溶液,用时定量稀释.55,60,70℃下,提取120min,其余操作与1121311相同.配制5%苯酚溶液:取苯酚100g,加铝片011g和1.2.3.4pH值的影响平行制备8份南瓜溶液,分别调节0105gNaHCO3,蒸馏收集182℃馏分,称取此馏分25g,加水pH为3.2,412,417,512,517,612,710,810,控制纤维素酶475g,溶解后盛于棕色试剂瓶中,放入冰箱备用.浓度为015%,在50℃下,提取120min,其余操作与1121311Sevag试剂:氯仿﹕正丁醇=4:1相同.仪器:D
