一株产中性蛋白酶海洋细菌的筛选与初步鉴定

《一株产中性蛋白酶海洋细菌的筛选与初步鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、食品与药品FoodandDrug2011年第l3卷第03期89一株产中性蛋白酶海洋细菌的筛选与初步鉴定肖峰，张浩，王斌，闫志勇’，宋旭霞，胡明，侯云，郑德志，樊瑞峰(1．青岛大学医学院病原生物学实验室，山东青岛266071；2．青岛中仁药业有限公司，山东青岛266329)摘要：目的从海洋环境及生物中筛选高产蛋白酶菌株，初步研究其生长特性及酶学特性，为进一步研究开发提供依据。方法将从青岛黄海海域的鱼类、贝类、海水、海泥等样品中分离的细菌，用奶粉平板法和Folin一酚法筛选蛋白酶酶活性较高的菌株，测定该菌株的最佳产酶条件并初步检测其酶学特点，通过形态学、分子生物学鉴定，初步确定种属。结果菌株为革兰

2、阴性杆菌，好氧，无芽孢，无荚膜，有鞭毛。奶粉平板上的菌落直径1～2mm，圆形乳白色、光滑、边缘整齐、半透明。根据16SrDNA序列测定和系统发育树分析，初步鉴定该菌为Aran&oM肋。该菌生长温度15~37℃，最适生长温度25℃。生KpH5．5-9．0，最适pH7．5。生长氯化钠浓度O％，最适浓度1％；所产蛋白酶的最适酶活性温度4o℃，最适pH7．5。结论菌株XF．1环境适应性较好，为中度嗜冷细菌。所产蛋白酶为中性蛋白酶。关键词：Aranicolaproteolyticus；嗜冷细菌；中性蛋白酶；海洋；筛选中图分类号：RTS225．24文献标识码：A文章编号：1672．979X(2011)00

3、．0089．05IsolationandIdentifcationofaMarineBacteriaStrainProducingNeutralProteaseXIAOFeng，ZHANGHao，WANGBin，YANZhi-yong，SONGXu—xia，HUMing，HOUYun，ZHENGDe．zhi2,FANRui．feng(1．LabofPathogenicOrgan&ms，CollegeofMedicine,QingdaoUniversity,Qingdao266071，China；2．QingdaoZhongrenPharmaceuticalCo．，Ltd．Qingdao2663

4、29，China)Abstract：0bjectiveToisolateaprotease-producingstrainofhighyieldfromtheocean，andmakeapreliminarystudyonitsgrowthcharacteristicandenzymaticpropertyoftheprotease．MethodsAprotease—producingstrainwiththehighestenzymeactivitywasisolatedfromtheseaareaofQingdao，usingmilkplateandFolin-phenolmethodfo

5、revaluatingproteinaseactivity．Theoptimalconditionofenzymeproductionwasscreenedandtheenzymatic收稿日期：2010．10—25基金项目：山东省科技攻关(2007GG3WZ05009)作者简介：肖峰(1982一)，男，山东威海人，硕士研究生，研究方向为基因工程药物E—mail：dubian_001@163．com通讯作者：王斌，男，教授，研究方向为分子病毒学与基因工程药物E—mail：wangbin31@yahoo．tom其表征初步分析[J】．食品研究与开发2007，5(128)：18一【8]JungDY，

6、JungS，YunJS．Influencesofcluturalmedium20．componentontheproductionofpoly(y-glutamicacid)byBacillus[2]黄金，陈宁．y一聚谷氨酸的性质与生产方法[J]_氨基酸和生物资sp．RKY3[J]．BiotechnoBioprocessEng，2005，10：289—295．源，2004，26(4)：44—48．【9】ShiF，XuZN，CenPL．Optimizationofy-polyglutamicacid【3】李晶博，李丁，邓毛程，等．y一聚谷氨酸的特性、生产及应用productionbyBacill

7、ussubtilisZJU·7usingasurface-response⋯．化工进展，2008，11(27)：1789—1799．methodology[J]．BiotechnolBioprocessEng，2006，11：251-257．[4]沙长青，李伟群，赵晓宇．纳豆芽孢杆菌(Bacillussubtilis[10]徐艳萍，王树英，李华钟，等．聚y．谷氨酸高产突变株的选naRo)固体发酵生