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《紫外分光光度法同时测定色氨酸和酪氨酸》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第28卷,第5期光谱实验室Vol.28,No.52011年9月ChineseJournalofSpectroscopyLaboratorySeptember,2011紫外分光光度法同时测定色氨酸和酪氨酸a徐澜安伟(山西忻州师范学院生化系山西省忻州市和平西街10号034000)a(山西农业科学院玉米研究所山西省忻州市新建北路14号034000)摘要以0.1mol/LNaOH为溶媒,18种组成蛋白氨基酸在280—310nm波长仅色氨酸和酪氨酸有吸收峰。利用这一特性,提出了色氨酸和酪氨酸混合体系的紫外光谱的测定方法,同时用偏最小二乘法(PLS)和多元线性回归法(MLR)等化学计量
2、学方法对光谱数据直接进行解析,结果都较为满意。本法已用于复方氨基酸注射液的测定,结果也很满意。关键词偏最小二乘法;多元线性回归法;色氨酸;酪氨酸中图分类号:O657.32文献标识码:A文章编号:1004-8138(2011)05-2320-041引言色氨酸(Try)作为人体的必须氨基酸之一,具有极其重要的生理功能和实用价值,它促进胃液分泌和脑代谢,治疗癞皮病。在医药上用于抗痉挛,食品行业中用作鱼类保鲜剂(BL-F)的重要成分,防止鱼蛋白的分解,还可用于预防发霉、消毒。色氨酸同时也是植物生长激素前体物和非营养性甜味剂。此外,色氨酸还显示出强的抗氧化性能,在食品中用作抗氧化剂。酪氨
3、酸(Tyr)及其衍生物如肾上腺激素、甲状腺素、多巴、巴胺等在机体内起激素和激素受体作用,与神经活动、行为以及大脑皮层的睡眠节律有关。色氨酸和酪氨酸也是肝、脑、肾疾患、外科手术、严重烧伤、儿童等药品的重要成分。所以对于它们的研究有着重要的意义,故对于它们的同时测定也越来越受到分析工作者[1—3]的重视。由于色氨酸、酪氨酸的紫外光谱、荧光光谱严重重叠,故同时测定时,需要用化学计量[4][5]学方法进行处理。曾有报道用导数光谱法,二阶导数荧光光度法同时测定不同样品中的色氨酸[6]和酪氨酸,有人用等吸光度法测定复方氨基酸注射液中色氨酸含量等。本文在一定的波长范围内测定它们在不同波长处的
4、吸光度值,采用偏最小二乘法和多元线性回归法同时测定合成样品和氨基酸注射液中色氨酸和酪氨酸的含量。测定结果相对误差都比较小,表明本方法有一定的应用价值。2实验部分2.1方法原理利用A=KC这一关系式,吸光度值A的大小取决于溶液所含色氨酸和酪氨酸的浓度值C,吸光度值与浓度成正比,若被测组分浓度为Ci,在某一特定的波长下则有:同时存在n个组分时,可建立如下方程:忻州师范学院院级科研基金项目(200905)联系人,手机:(0)13037008407;电话:(0350)3048252;E-mail:ymsanwei@sohu.com;tinchenliang@yahoo.com.cn
5、作者简介:徐澜(1975—),女,山西省偏关县人,讲师,硕士,主要从事生物化学及分子生物学的教学科研工作。收稿日期:2010-11-15;接受日期:2010-12-20第5期徐澜等:紫外分光光度法同时测定色氨酸和酪氨酸2321Ai=KiCi+a(i=1,2…1)(a——测量误差)A1=K11C1+K12C2+…+K1nCn+a1……Ap=Kp1C1+Kp2C2+…+KpnCn+ap(1)如果写成矩阵形式,则可简写为:A11A12…A1mK11K12…K1nC11C12…C1mA21A22…A2mK21K22…K2nC21C22…C2m=×………………Ap1Ap2…ApmKp1K
6、p2…KpnCn1Cn2…Cnm上述表达式可简写为[A]p×m=[K]p×n[C]n×m式(1)即可求得K矩阵,在多元分析中称为校正,然后再依据所确定的数学模型对未知样品进行分析。本文采用多元线性回归法和偏最小二乘法处理,结果较为满意。2.2仪器和试剂756MC型紫外分光光度计、751G型紫外分光光度计(上海分析仪器厂);AB204-N电子分析天平[梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司];DL-色氨酸C11H12NO2(层析纯,中国科学院生物化学研究所);DL-酪氨酸C9H11NO3(纸色谱纯,政翔医用科技实业服务部化学试剂研究所);复方氨基酸注射液(国药准字H20013240,
7、18AA,四川科伦大药厂有限责任公司);氢氧化钠(分析纯,天津市科密欧化学试剂开发中心)。实验用水为二次蒸馏水。2.3配制储备液准确称量2.000gNaOH用水配制0.1mol/LNaOH溶液500mL,再称取色氨酸0.0204g和酪氨酸0.0181g,分别用0.1mol/LNaOH溶液为溶-3剂配制1.0×10mol/L色氨酸和-31.0×10mol/L酪氨酸标准储备液各100mL。2.4实验方法分别用0.1mol/LNaOH溶液配制一系列标准混合液,用1cm的石英比色皿在280—310n
