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1、固相萃取-高效液相色谱法同时测定食品中12种合成色素———奚星林,等—217—61humancalicivirusesinfecalsamplesbyRT-PCR[J].Methods为此,本实验将浓度为10~10拷贝的GⅡ型MolBiol,2011,665:39-50.SLVs阳性质粒污染到牡蛎中,分别进行荧光定量[5]唐振柱,孙贵娟,黄彦,等.实时荧光PCR在食源性致病菌监PCR和常规RT-PCR扩增。结果发现,常规RT-PCR测中的应用研究[J].中国食品卫生杂志,2011,22(4):3最低检测限为10拷贝数;荧光定量PCR法最低检332-335
2、.2测限则为10拷贝数,灵敏度比常规RT-PCR高10'[6]PREZ-SAUTUU,GUIXS,PINTORM,etal.Quantification倍,而检测方法敏感程度对于浓度较低的札幌样病andgenotypingofhumansapovirusesintheLlobregatrivercatchment,Spain[J].ApplEnvironMicrobiol,2011,77(3):毒监测是很重要的。1111-1114.本实验分别用荧光定量PCR和常规RT-PCR[7]UEKIY,SHOJIM,OKIMURAY,etal.Detection
3、ofSapovirus对127份牡蛎标本进行GⅡ型札幌样病毒检测,结inoysters[J].MicrobiolImmunol,2010,54(8):483-486.果显示,荧光定量PCR检测为阳性的有6例,常规[8]KINGSLEYDH.AnRNAextractionprotocolforshellfish-borneRT-PCR检测为阳性的有1例,前者检出率显著高viruses[J].JVirolMethods,2007,141(1):58-62.于后者。因此荧光定量PCR法是更适合牡蛎中G[9]JIANGX,HUANGPW,ZHONGWM,etal
4、.DesignandevaluationofaprimerpairthatdetectsbothNorwalk-andⅡ型札幌样病毒快速检测的方法。Sapporo-likecalicivirusesbyRT-PCR[J].JVirolMethods,1999,83(1-2):145-154.参考文献[10]KITAJIMAM,HARAMOTOE,PHANUWANC,etal.[1]VINJJ,DEIJLH,vanderHEIDER,etal.MolecularGenotypedistributionofhumansapovirusesinwastewa
5、terindetectionandepidemiologyofSapporo-likeviruses[J].JClinJapan[J].ApplEnvironMicrobiol,2011,77(12):4226-4229.Microbiol,2000,38(2):530-536.[11]SUFFREDINIE,PEPET,VENTRONEI,etal.Norovirus[2]NAKAGAWA-OKAMOTOR,ARITA-NISHIDAT,TODAS,etdetectioninshellfishusingtwoReal-TimeRT-PCRmethods
6、[J].al.DetectionofmultiplesapovirusgenotypesandgenogroupsinNewMicrobiol,2011,34(1):9-16.oyster-associatedoutbreaks[J].JpnJInfectDis,2009,62(1):[12]SHIGEMOTON,FUKUDAS,TANIZAWAY,etal.Detection63-66.ofnorovirus,sapovirus,andhumanastrovirusinfecalspecimens[3]方肇寅,谢华萍,吕红霞,等.1999~2005年我
7、国婴幼儿人杯usingamultiplexreversetranscription-PCRwithfluorescentdye-状病毒腹泻研究[J].病毒学报,2007,23(1):9-15.labeledprimers[J].MicrobiolImmunol,2011,55(5):369-372.[4]ATMARRL,NEILLFH,LEGUYADERFS.Detectionof实验技术与方法固相萃取-高效液相色谱法同时测定食品中12种合成色素奚星林,邵仕萍,徐娟,邹志飞,吴宏中(广东检验检疫技术中心,广东广州510623)摘要:目的建立一种固相萃取-
8、高效液相色谱法同时测定食品中12种合成色素(柠檬黄、亮黑、日落黄、诱惑红、坚牢绿
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