福建荔枝种质资源的ISSR分析

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1、福建农林大学硕士学位论文福建荔枝（LitchichinensisSonn.）种质资源的ISSR分析姓名：王江波申请学位级别：硕士专业：果树学指导教师：潘东明20090401福建农林大学硕士论文摘要摘要荔枝属无患子科(Sapindaceae)荔枝属，荔枝属只有荔枝(LitchichinensisSonn．)和菲律宾荔枝犯．philippinensisRadl．)两个种，荔枝是唯一的栽培种，在云南发现2个荔枝变种，即褐毛荔枝犯．chinensmvat．futvosusYQLee)和光头荔枝但．chinensisvat．spontaneousPei)。中国是荔枝的起源与驯化

2、中心，也是目前国际上最主要的荔枝生产国，年总产量占到95％左右，栽培面积在60万hm2以上。本研究在开展福建荔枝栽培品种资源调查的基础上，运用ISSR分子标记，研究了78份荔枝样品的遗传多样性，为福建省荔枝种质资源的有效保护和合理利用提供科学依据，为荔枝新品种的培育提供遗传背景。主要研究结果如下：1．针对荔枝富含酚类化合物和多糖等物质导致DNA提取和纯化困难的问题，采用经过改良的SDS法提取的荔枝DNA，不论从数量还是纯度上均可满足RAPD分析要求，摸索提出了合适的荔枝DNA提取方法。2．研究建立了荔枝ISSR．PCR反应的技术体系。201．tL的反应体系中采用20n

3、g的模板DNA，O．15pmoVLISSR引物，1．25UTaqDNA聚合酶，0．15pmol／LdNTP，以及54"---'56℃的复性温度为荔枝1SSR．PCR扩增条件的最佳选择。按照此体系，94℃预变性5min；94。C变性30s；退火lmin；72℃延伸1．5min．循环40次；然后72℃延伸7min。该体系扩增出的条带清晰，效果良好，能够满足ISSR分析。3．从96个引物中筛选出11个ISSR引物，对78份荔枝样品进行了ISSR分析。共扩增出127条带，其中多态性为122条，多态性百分率为96．06％。同时发现序YU为(AG)n、(CA)n、(AC)n的引物

4、扩增出的条带多态性较高，其所占比例也最高。说明荔枝基因组中(TC)n、(GT)n、(TG)n含量丰富。4．依据ISSR分析结果，对供试的78个品种进行聚类分析，结果表明：它们之间的遗传相似系数在0．454"-'0．985之间，揭示了不同品种之间遗传多样性、遗传相似性与亲缘关系，为以后荔枝远缘杂交，获得优质荔枝品种提供了依据，提高育种效率奠定了一定的理论基础。5．解决了古荔枝与现在栽培荔枝品种的关系；解释了品种间同名异物、同物异名的问题：解释了生产上有些品种性状不稳定的问题。关键词：荔枝；遗传多样性；ISSR：亲缘关系II福建农林大学硕士论文ISSRanalysisof

5、germplasmresourcesofFuJian●．■●■●，、Z纪忍ZC尼Z咒PnSiS30nn．AbstractLitchigenusbelongstotheSapindaceaefamilyandhastwospecies,LitchichinensisSonn．andL．philippinensisRadl．．L．chinensisSoma．istheonlycultivatedspeciesandtwoLitchivarieties,L．chinensisvar．fulvosusYQLeeandL．chinensisvar．spontaneousPeiw

6、erefoundinYunnan．ChinaisthecenterofLitchi’Soriginanddemostication，themainproductioncountryrecentlyintheworld，produced95％ofthetotalproductionintheworld，cultivatedmorethan600000ha．BasedontheinvestigationofLitchicultivarresourceinFuJianProvince，inthisstudywetookadvantageofISSRmolecularmark

7、er,researchedthegeneticdiversityof78Litchisamples，providedscientificbasisineffectivetprotcetionandrationalultilizationforLitchigernplasmresourceinFuJianProvinceandgeneticbackgroundforthebreedingofLitchinewvariety．Mainstudyresultsareasfollow．Inthisstudy,inter-simplesequencerepea