山药种质资源遗传多样性的issr分析

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1、l前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．41．1种质资源多样性的研究方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．41．1．1种质资源多样性的概念⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．41．1．2种质资源多样性的研究方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．51．1．2．1形态学研究方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．51．1．2．2细胞学研究方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．61．1．2．3生化研究方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．1．2．4DNA分子标记研究方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．71．2山药种质资源的研究概况⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．91．2．1山药简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．91．2．2我国山药的种类及分布⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．91．2．3山药种质资源遗传多样性研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯101．2．3．1形态学研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯101．2．3．2生化研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．101．2．3．3DNA分子研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．101．3ISSR技术及其在种质资源多样性研究中的应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯111．3．1ISSR技术简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．111．3．2ISSR标记技术的原理‘⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．121．3．3ISSR标记的技术特点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．121．3．4ISSR技术在种质资源多样性研究中的应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．3．4．1种质资源鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．131．3．4．2植物亲缘关系分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．141．4本项研究的意义目的⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．142材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．152．1材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯152．1．1供试材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．152．1．2主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．162．2方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯162．2．1．种植方案⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．16l福建农林大学硕士学位论文2．2．2数据采集⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．172．2．3DNA提取与检测、电泳检测、ISSR反应体系⋯⋯⋯⋯⋯⋯．：⋯⋯．．172．3统计分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．173结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯．183．1山药形态多样性分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．183．1．1叶的形态多样性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．183．1．2地下茎的形态多样⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．223．2山药遗传多样性ISSR分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．253．2．1ISSR引物筛选与扩增⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．253．2．2ISSR标记系统聚类分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯294讨论与结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．3l4．1山药种质资源形态标记的总体分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．31

6、4．2山药种质资源ISSR标记的总体分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．35致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．4lIl福建农林大学硕士学位论文中文摘要山药(DioscoreapolystachyaTurcz．)是一种药、食两用的高效特色经济作物，资源种类多，具有复杂的遗传背景，仅凭借形态特征难以对其鉴定和分类。而ISSR技术，是一种鉴定山药种质实用、有效的工具，能为山药育种亲本的选择、利用以及核心种质的构建，提供分子水平的依据和技术支持。因此，本文利用ISSR技术

7、，对全国13个省不同地区的94个山药种质资源进行遗传多样性分析，并通过农艺性状调查，将其分类。主要研究结果如下：l、形态多样性研究(1)叶片长度2．95．15．07cln，田薯lO．15cm，山薯6．10锄；褐苞薯蓣5．10锄，薯蓣3．8cm。最小为sm41，最长为sin47。(2)叶片宽度2．72．12．3l锄，田薯6—12Crll，山薯4．7锄，褐苞薯蓣4—8cm，薯蓣3．7em。最短为sm41，最长为sm57。(3)叶形指数相对稳定，在1．0．1．7之间。田薯1．1．1．7elll，山薯1．4．1．7till，褐苞薯蓣1．1．1．

8、6elll，薯蓣1．O．1．6锄。(4)叶柄长度在1．34．9．54tin，最短为sm41，最长为sm46。(5)块茎干物质含量6．85-42．65％。2、ISSR遗传多性研究从100条ISSR随机引物中筛