实验二细菌、放线菌的形态观察

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1、实验二细菌、放线菌形态观察河南工业大学微生物学实验室1.掌握细菌的制片和染色技术2.掌握放线菌形态观察方法3.熟练油镜的使用方法一、实验目的及要求二、细菌染色的基本原理细菌细胞小而透明，在普通光学显微镜下不易识别，必须对它们进行染色。细菌常用碱性染料来进行简单染色，这是因为在中性，碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，而碱性染料在电离时，其分子的染色部分带正电荷，很容易使细菌结合使菌体着色，经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比，在显微镜下更易于识别。三、实验材料1、菌种金黄色葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、大肠杆菌、灰色链霉菌等。2、器材显微镜

2、、载玻片、盖玻片、接种针、无菌水、香柏油、碱性染料番红、结晶紫等。四、实验方法和步骤1、细菌简单染色取菌（要求无菌操作）—涂片—干燥—固定—染色（1min）—水洗—干燥—镜检（注意形状、大小、排列方式）四、实验方法和步骤1、细菌简单染色取菌（要求无菌操作）—涂片—干燥—固定—染色（1min）—水洗—干燥—镜检（注意形状、大小、排列方式）葡萄球菌四、实验方法和步骤2、放线菌菌落形态观察（1）表面形状大小、颜色、边缘、紧密程度等。（2）区别营养菌丝、气生菌丝、孢子丝四、实验方法和步骤（2）区别营养菌丝、气生菌丝、孢子丝四、实验方法和步骤3.气生菌

3、丝、孢子丝的活体观察将培养皿盖打开，选择菌丝和孢子丝生长较薄的部位，直接用低倍镜和高倍镜观察。4．气生菌丝、孢子丝的印片观察载玻片—滴1滴美兰染液—盖玻片印片—印片面向下置于美兰中—吸去多余染液—镜检（用油镜观察）——维护还原显微镜。1、绘出所观察的几种细菌和放线菌的形态并注明名称和放大倍数。2、放线菌菌落和细菌菌落有何不同之处？3、放细菌的菌体为何不易挑取？五、思考题