实验六 放线菌形态观察

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1、实验六----放线菌的形态观察山东大学生命科学学院09级四班张行润200900140177摘要放线菌的菌丝分化为两部分，即长入培养基内的营养菌丝（又称基内菌丝）和生长于培养基表面的气生菌丝（又称繁殖菌丝）。有些放线菌的气生菌丝分化成各种孢子丝，其形状和分支都不同，孢子形状也不相同。这些特征是识别放线菌和分类的重要依据，对于我们研究放线菌具有相当重要的作用。关键词放线菌（Actinomycetes）基内菌丝（Substratemycelium）气生菌丝（Aerialmycelium）前言Actin

2、omycetes是一类具有丝状分枝的单细胞,主要以外生孢子的形式繁殖,革兰氏阳性,与细菌同属原核微生物.放线菌菌菌落中的菌丝常从一个中心向四周辐射状呈放射状生长,并因此而得名.放线菌有特殊的土霉味.分布:含水量较低,有机物丰富,呈微碱性的土壤中.估计每克土壤中约含放线菌孢子107个.应用:放线菌对人类最突出的贡献就是它能产生大量的,种类繁多的抗菌素.放线菌还是酶类,维生素的生产菌;有的放线菌有固氮能力;放线菌在自然界物质循环中也起着重要作用,由于它们具有较强的分解复杂有机物的能力,对于土壤肥力

3、的提高也有重要作用.危害:只有极少数放线菌对人类构成危害,某些Actinomyces(放线菌属)菌种引起动物放线菌病(皮肤,脑,肺和足部感染),某些Nocardia(诺卡氏菌属)引起人和动物的诺卡氏菌病;还有少数放线菌能引起植物病害.一、实验目的1.掌握放线菌形态观察的基本方法2.了解放线菌的形态3.巩固显微镜操作技术及无菌操作技术二、实验原理插片法放线菌菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和孢子丝组成，制片时不采取涂片法，以免破坏细胞及菌丝体形态。通常采用插片法或玻璃纸法并结合菌丝体的简单染色进行观察。

4、在插片法中，首先将灭菌的盖玻片插入接有放线菌的平板，使放线菌盖玻片和培养基交界处生长而附着在盖玻片上，取出盖玻片可直接在显微镜下观察放线菌在自然生长状态下的形态特征，而且有利于对不同生长时期的放线菌的形态进行观察。1三、仪器材料A.菌种青色链霉菌、弗氏链霉菌B.仪器和其它用品酒精灯、载玻片、盖玻片、显微镜、双层瓶（内装香柏油和二甲苯）、擦镜纸、接种针、高氏一号培养平板等四、试验方法a)倒平板将配好的高氏一号培养基经灭菌锅灭菌后，经无菌操作倒平板；b)冷却放在桌面上冷却，注意勿动；c)划线接种无菌操

5、作分别将青色链霉菌和弗氏链霉菌挑取菌种在到高氏一号培养基平板上密集接种划线，注意划线要密集，一个菌种划三个平板；d)插片无菌操作用镊子取灭菌盖玻片以45°角插入平板琼脂接种线上e)培养将平板倒置，于28℃恒温箱种培养5-7df)镜检用镊子小心取出盖玻片，用纸擦去背面培养物，有菌面朝上放置在载玻片上，通过显微镜直接用低倍镜和高倍镜观察注意事项培养放线菌中要注意，放线菌的生长速度较慢，培养期较长，在操作中应特别注意无菌操作，严防杂菌污染。五、实验结果及分析1.实验结果2弗氏链霉菌10×100青色链霉菌

6、10×10032.实验分析放线菌的菌丝分化为两部分，即长入培养基内的营养菌丝（又称基内菌丝）和生长于培养基表面的气生菌丝（又称繁殖菌丝），其中基内菌丝外观透明，而气生菌丝而外观较暗；在我们本次所选择的实验材料（青色链霉菌和弗氏链霉菌）中，青色链霉菌的孢子丝形态为螺旋状，弗氏链霉菌的孢子丝形态则比较直，比较容易区分。六、实验小结通过本次试验，我学会了放线菌形态观察的方法，在实验的过程中不仅掌握了插片法等微生物实验操作技术，而且也了解一些关于放线菌的基本知识，如其菌丝形态、颜色等等，在实验的过程中叶遇

7、到了一些操作上的问题，但我们最终顺利完成了本次实验，相信本次实验的认识和经验将会对以后的微生物学习大有裨益。参考文献詹火元生物学通报1995年底30卷第2期p34沈萍，陈向东.微生物学.第二版.北京:高等教育出版社，2006沈萍，陈向东.微生物学实验.第4版.北京:高等教育出版社，20074