实验放线菌的形态观察

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1、实验放线菌的形态观察主讲人:袁建赣南昌大学生物技术系一、目的辩认放线菌的营养菌丝、气生菌丝、孢子丝、孢子的形态；学习掌握水封片法、玻璃纸法、影印法制作放线菌涂片。二、原理放线菌的菌丝分化为两部分，即长入培养基内的营养菌丝（又称基内菌丝）和生长于培养基表面的气生菌丝（又称繁殖菌丝）。有些放线菌的气生菌丝分化成各种孢子丝，其形状和分支都不同，孢子形状也不相同。这些特征是识别放线菌和分类的重要依据。放线菌的菌落早期绒状同细菌菌落月牙状相似，后期形成孢子菌落呈粉状、干燥，有各种颜色呈同心圆放射状。放线菌纲中几种带孢子结构的显微照相。（a）链霉菌，单轮

2、生类型。（b）链霉素，螺旋形类型。菌丝体宽度均约为0.8μm。三、材料、试剂与器具1、材料细黄链霉菌（Streptomycsmicroflavus）又称5406放线菌斜面菌种，棘孢小单孢菌（Micromonosporaechinospora）斜面菌种，高氏1号平板。0.1%美蓝染色液，石炭酸复红染色液，无菌水2、器具显微镜，载玻片，镊子，接种环，玻璃刮，玻璃纸等。四、操作步骤1、水封片观察（1）取一套高氏1号平板，将菌种划线方法接种，把灭菌过的盖玻片斜插在培养基中，一半露出，在28℃下培养5～7d备用。（2）取一滴美蓝染色液置于载玻片中央，将

3、上述长有菌丝的盖玻片取出，把一面的培养基擦净。然后把长菌丝一面朝下，盖住染色液，制成水封片，用高倍镜观察其气生丝、孢子丝和孢子。影印法观察：用涂却法或划线法培养出单个菌落，然后用小刀小心地刮一个菌落，翻过压印在载玻片中央，小心地移开菌落，载玻片中央就留下菌落印痕。在火焰下固定，滴一滴石碳酸复红染色1min，水洗后晾干，在高倍镜，或油镜下观察。插片法:倒平板→插片→接种→培养→镜检→记录绘图压印法:倒平板→划线接种→挑取菌落→加盖玻片→镜检→记录绘图埋片法:倒琼脂→切槽→接种→培养→镜检→记录绘图五、注意事项1、放线菌生长较慢，培养时间较长，所以

4、在接种和培养时要注意无菌操作，严防杂菌无染。六、实验报告1、绘图，比较这两种放线菌的形态特征的异同。2、比较这两种方法的优缺点。七、思考题1、在显微镜下，如何区别营养菌丝和气生菌丝。