实验十、放线菌形态的观察

《实验十、放线菌形态的观察》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、放线菌形态的观察生命科学学院微生物学教研室－YJH实验的目的要求学习并掌握观察放线菌形态的基本方法初步了解放线菌的形态特征生命科学学院微生物学教研室－YJH基本原理放线菌：基内菌丝气生菌丝孢子丝能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌，是由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细胞菌丝体。生命科学学院微生物学教研室－YJH基内菌丝和气生菌丝形态比较基内菌丝气生菌丝位置颜色直径在培养基内和表面位于下层浅细在培养基上方位于上层深粗生命科学学院微生物学教研室－YJH扦片法原理将放线菌接种在琼脂平板上，扦上灭菌盖玻片后培养，使放线菌菌丝沿着培养基表面与

2、盖玻片的交接处生长而附着在盖玻片上。观察时，轻轻取出盖玻片，置于载玻片上直接镜检。这种方法可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长期的形态。生命科学学院微生物学教研室－YJH玻璃纸法原理玻璃纸是一种透明的半透膜，具有半透膜特性，其透光性与载玻片的基本相同，将灭菌的玻璃纸覆盖在琼脂平板表面，然后将放线菌接种于玻璃纸上，经培养，放线菌在玻璃纸上生长形成菌苔。观察时，揭下玻璃纸，固定在载波片上直接镜检。这种方法既能保持放线菌的自然生长状态，也便于观察不同生长期的形态特征。生命科学学院微生物学教研室－YJH印片法原理将要观察的放线菌

3、的菌落或菌苔，先印在载波片上，经染色后观察。这种方法主要用于观察孢子丝的形态，孢子的排列及其形状等。方法简便，但形态特征可能有所改变。生命科学学院微生物学教研室－YJH实验材料菌种：未知放线菌培养基：高氏I号琼脂试剂石炭酸复红染液仪器和用具载玻片盖玻片滤纸平皿玻璃纸玻璃涂棒显微镜镜头纸接种环接种铲镊子生命科学学院微生物学教研室－YJH方法扦片法玻璃纸法印片法生命科学学院微生物学教研室－YJH扦片法取融化并冷却至大约50C的高氏I号琼脂约20mL倒平板，凝固备用。倒平板接种用接种环挑取菌种斜面培养物（孢子）在高氏I号琼脂平板上划线接种。扦片

4、无菌操作用镊子将灭菌盖玻片以大约45角在接种线上扦入琼脂内。培养将扦片平板倒置，28C培养3-5天。镜检用镊子小心拔出扦片，擦去背面培养物，将有菌的一面朝上放在载玻片上，直接显微镜观察。生命科学学院微生物学教研室－YJH玻璃纸法倒平板取融化并冷却至大约50C的高氏I号琼脂约20mL倒平板，凝固备用。铺玻璃纸无菌操作用镊子将灭菌的玻璃纸铺在高氏I号琼脂表面，用无菌玻璃涂布棒将玻璃纸压平。接种用接种环挑取菌种斜面培养物（孢子）在玻璃纸上划线接种。培养将平板倒置，28C培养3-5天。镜检在洁净载玻片上滴一滴水，用镊子小心取出玻璃纸，菌面朝

5、上平贴在载玻片上，显微镜观察。生命科学学院微生物学教研室－YJH印片法印片取融化并冷却至大约50C的高氏I号琼脂约20mL倒平板，凝固备用。接种培养倒平板用接种环挑取菌种斜面培养物（孢子）在高氏I号琼脂平板上划线接种。将扦片平板倒置，28C培养4-7天。染色用接种铲或解剖刀将菌台连同培养基切下一小块，菌面朝上放在一载玻片上，取另一块载玻片在酒精灯上略微加热后，盖在菌苔上，轻轻按压，使培养物黏附在微热的载波片上，印迹朝上，通过酒精灯火焰2-3次固定。用石炭酸复红覆盖印迹，染色约1分钟后水洗。镜检油镜观察。生命科学学院微生物学教研室－YJH

6、基内菌丝又称为基质菌丝、营养菌丝或一级菌丝；是孢子发芽后不断伸长、分枝并放射状在培养基内部和表面形成的大量色浅、较细的具有吸收营养和排泄代谢废物功能的丝状结构。空间位置位于下层。生命科学学院微生物学教研室－YJH气生菌丝又称为二级菌丝；是由基内菌丝向上向空间方向分化形成的颜色较深、直径较粗的分枝菌丝。空间位置位于上层。生命科学学院微生物学教研室－YJH孢子丝孢子丝是由气生菌丝分化形成的各种形状和着生方式的丝状结构。形态多样：有直、波曲、钩状、螺旋状、轮生等。空间位置位于上层。生命科学学院微生物学教研室－YJH