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1、胎兔骨髓基质细胞与聚β【关键词】骨髓基质细胞ExperimentalstudyofBMSCPHBcomplexinreconstructingbonedefectLIULiPing1,GAOZhuoPing1,WUJingHua2,FANMengYun1,AIYuFeng2,PENGPai21DepartmentofOtorhinolaryngology,XianFourthMunicipalHospital,Xian710004,China,2DepartmentofPlasticSurgery,XijingHospital,FourthMil
2、itaryMedicalUniversity,Xian710033,China【Abstract】AIM:TostudytheboneformationofBMSCPHB(bonemarrowstromalcellspolyβhydroxybytyrate)complexinrabbitandtoscreenoutthebestpossiblehumantissueengineeredbone.METHODS:BMSCwasfirstculturedonthePHBmaterialsurfacetoformtheBMSCPHBcomplexand
3、thenthecomplexwasimplantedintorabbitmandibularbone.PHBmaterialswithoutBMSCwereimplantedascontrol.Theboneformationwasstudiedrespectivelyafter4weeksand8weeksbyHEstaining,electronmicroscopyandXray.RESULTS:BoneformationwasfoundonthesurfaceofPHBafter4weeks,whilenoboneformationwasf
4、oundinthecontrolgroup.CONCLUSION:BMSCPHBcomplexisanidealtissueengineeredbonetoreconstructbonedefect.【Keywords】bonemarrowstromalcells;polyβhydroxybytyrate;bonesubstitutes;biomedicalengineering【摘要】目的：研究兔骨髓基质细胞（BMSC）与聚β羟基丁酯（PHB）复合物在成兔体内培养后成骨情况，选出最理想的人工组织工程骨.方法：将体外培养的骨髓基质细胞种植于PHB
5、支架材料上形成复合物，再植入成兔体内培养，同时用单纯PHB材料植入作对照.分别于4，8wk后照X光片，取材行光镜和扫描电镜观察其成骨情况.结果：PHB与BMSC的复合物在兔体内于4wk后已有骨组织形成，而对照组的缺损无修复迹象.结论：PHB与BMSC的复合物完全可以做成理想的组织工程人工骨修复骨缺损.【关键词】骨髓基质细胞；聚β羟基丁酯；骨代用品；生物医学工程0引言聚β羟基丁酯（polyβhydroxybytyrate,PHB）因其良好的生物相容性和生物降解性，可做为理想的骨组织工程材料［1］.我们选择PHB与兔骨髓基质细胞（bonemarrow
6、stromalcells,BMSC）的复合物，移植至成兔下颌骨缺损处，进行了修复骨缺损实验研究.1材料和方法1.1材料PHB（由西北大学、西北工业大学和第四军医大学西京医院整形外科中心联合研制.纯度达998%,微孔支架孔径<70μm，孔隙率>95%）.DMEM(Gibco,USA)，小牛血清（杭州四季青生物制品公司），胰蛋白酶（天象生物制品公司），MTT,Ⅰ型胶原,β甘油磷酸钠，地塞米松，L抗坏血酸（Sigma），BB16型CO2培养箱（Heraeus,上海）,LG103A低温高速离心机（北京医用离心机厂），褪毛剂（自配），速眠新由第四军医大学实
7、验外科提供.1.2方法1.2.1PHB支架材料的制备PHB微孔支架经Ⅰ型胶原包埋，冷冻干燥处理，钴60辐射消毒后，分装4瓶中，每瓶2块，每块约10cm×10cm×06cm.1.2.2骨髓基质细胞的分离及培养取出生3d的纯种白兔1只（体质量5135g，由第四军医大学实验动物中心提供）.耳静脉注入空气栓塞致死.用褪毛剂褪去四肢兔毛，用碘伏消毒四肢皮肤，铺无菌手术巾.切开皮肤，取出四肢骨，将骨表面软组织去除干净.用DMEM液冲洗，置于含200g/L小牛血清（FBS）的DMEM液培养皿中，以眼科剪将骨质剪碎，置于37℃，50mL/LCO2饱和湿度条件下培
8、养.隔日换液，观察.在原代细胞融合成单层后，以25g/L胰酶消化，调整密度至（05~1）×107/L，以1∶1的比例传代，并改用条件培养
