抑癌基因P16甲基化在子宫颈癌早期诊断中的初步探讨

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1、抑癌基因P16甲基化在子宫颈癌早期诊断中的初步探讨作者：任力群,刘萍,王云霞,罗丽娅单位：深圳市福田区妇幼保健院，广东深圳518000【摘要】目的:通过观察抑癌基因P16异常甲基化在子宫颈癌中的阳性率，探讨抑癌基因P16异常甲基化在子宫颈癌早期诊断中的临床意义。方法:分离提取71例慢性宫颈炎患者，76例CIN患者，36例宫颈癌患者标本中的DNA，采用巢式甲基化特异性PCR方法检测P16基因的甲基化状态。结果:在7例宫颈癌患者标本检测到了P16异常甲基化，阳性率为19.4%；在4例CIN癌患者标本中检测到了P16异常甲基化，阳性率为5.3%；健康对照者

2、标本中P16基因无异常甲基化。结论:抑癌基因P16异常甲基化随宫颈瘤样病变的加重而阳性率增高，P16异常甲基化是宫颈发生的过程中的早期事件，对于宫颈癌的早期诊断具有重要意义。【关键词】宫颈癌P16甲基化特异性PCR　　DiscussionoftheValueofInhibitingGeneMethylicP16inEarlyDiagnosisofCervicalCancer　　RENLiqun1,LIUPing2,WANGYunxia2,LUOLiya2　　(MaternalandChildHealthHospitalinFutianDistr

3、ictofShenzhen,Shenzhen,Guangdong518026,China)Abstract:ObjectiveThroughobservingthepositiverateofinhibitinggenemythylicP16incervicalcancer,todiscusstheclinicalsignificanceofinhibitinggenemythylicP16inearlydiggnosisofcervicalcancer.MethodsSeparateanddistillDNAofthesamplesof71chro

4、niccervicitispatients,76CINpatientsand36cervicalcancerpatients,todetectthecymenestatusofP16genewithmethylicdifferentialnestPCRtest.ResultsThereare8cervicalcancerpatientsand4CINPatients,theirsamplesaredetectedwithabnomalmethylicP16,thepositiveratesare22.2%and5.3%respectively;th

5、erearenocasesdetectedwithabnomalmethylicP16inhealthpeople.ConclusionInhibitinggeneabnomalmethylicP16becomehigherwithcervicalneoplasia,itisaearlyeventintheprocessofcervicalcancer.Soithasimportantclinicalsignificanceinearlydiagnosisofcervicalcancer.Keywords:Cervicalcancer;P16;Met

6、hylicdifferentialPCR　　P16基因作为抑癌基因已受到广泛关注，已有文献报道P16与原发性子宫颈癌发生、发展的关系，但尚存在一些不同观点。宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤之一,它的发生是一多因素、多步骤的过程,近年来的研究显示肿瘤相关基因启动子区的异常甲基化是导致抑癌基因表达失活的一个重要途径,这种过甲基化是肿瘤发生过程中的早期事件,是一种新的肿瘤分子标志物［1，2］。本研究通过观察抑癌基因P16启动子区的甲基化在不同级别的子宫颈宫颈瘤样病变、子宫颈癌中的阳性率，探讨P16异常甲基化在子宫颈癌早期诊断中的临床意义。　　1．1材料与方法　　

7、1.1研究对象研究对象的选取：取2005年7月至2007年4月在湖北省肿瘤医院及我院治疗的宫颈鳞癌患者治疗前宫颈脱落细胞及活检标本或手术切除的肿瘤标本。其中宫颈癌36例(术前未行任何治疗),CIN标本76例，慢性宫颈炎患者71例为对照组。患者年龄32岁～74岁,中位年龄50岁。宫颈癌FIGO分期Ⅰ期7例,Ⅱ期14例,Ⅲ期15例。　　1.2方法　　1.2.1标本处理P16基因检测取活检标本或手术切除的肿瘤标本，分离肿瘤组织及癌旁非肿瘤组织，按Roche公司高纯度PCR模板备用试剂盒说明分别提取基因组DNA。CIN患者及慢性宫颈炎患者同时平行测定。　　1

8、.2.2P16基因启动子区甲基化检测采用巢式甲基化特异性PCR检测P16基因启动子区甲基化状态，检测方法［3