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1、不同孕期小鼠羊水对小鼠肝癌细胞H22增殖和凋亡的影响作者：丁雅明,方廖琼,周兰,张弘,白晋单位：(重庆医科大学生物医学工程系,重庆医科大学医学超声工程研究所,重庆400016) 摘 要:目的 观察不同孕期小鼠羊水对小鼠肝癌细胞H22增殖和凋亡的影响。方法 用孕11、13、15d和17d的KM小鼠羊水-RPMI1640培养基培养H22细胞(培养液中羊水终浓度为10%),RPMI1640培养基培养的H22细胞作为对照组,采用MTT法检测细胞的增殖能力;AnnexinV-FITC法检测细胞凋亡率,透射电镜观察细胞形态;S-P免疫荧光染色法经激光共聚焦显微镜分析H22细胞中增殖细胞核抗原(PC
2、NA)和p53的表达。结果 羊水能明显抑制H22细胞的体外增殖和PCNA的表达,随孕期的延长而增高(P<0•05);并能促进p53的表达以及诱导H22细胞凋亡,随孕期的延长而降低(P<0•05)。同时,PCNA和p53的表达强度具有明显的负相关性(r=-0.808,P<0•01)。结论 孕11、13、15、17d的小鼠羊水能抑制H22细胞增殖,诱导其凋亡,可能与PCNA和p53的表达有关,并且孕期越早、干预时间越长,效果越显著。 关键词:H22细胞;羊水;凋亡;增殖细胞核抗原;p53 中图法分类号:R73-354;R73-36;R735
3、.7文献标识码:AEffectsofmouseamnioticfluidcollectedondifferentgestationaldaysonprolifera-tionandapoptosisofH22cellsinvitroDINGYa-ming,FANGLiao-qiong,ZHOULan,ZHANGHong,BAIJin,WANGZhi-iaoDepartmentofBiomedicalEngi-neering,InstituteofUltrasoundEngineeringnMedicine,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing40001
4、6,China) Abstract:Objective ToinvestigatetheeffectsofmouseamnioticfluidontheproliferationandapoptosisofmousehepatomacellineH22.Methods TreatedwiththemixtureofRPMI1640mediumand10%mouseamnioticfluidcollectedrespectivelyongestationalday11,13,15and17orRPMI1640mediumascontrol,theproliferationofH22cel
5、lswasdetectedwithMTTandtheapoptosisofH22cellswithAnnexinV-FITC;H22cellswereobservedmorphologicallyunderelectronmicroscope;Theexpressionsofproliferatingcellnuclearantigen(PCNA)andp53inH22cellswereinvestigatedwithimmunofluorescencestaining(S-Pmethod)andlasercon-focalmicroscopy.Results Amnioticfluid
6、significantlyinhibitedthecellproliferationaswellasthePCNAex-ressions,increasedthep53expressionsandinducedcellapoptosis.Theamnioticfluidcollectedongestationalday11wasthemosteffective,whilethatofgestationalday17wastheleasteffective(P<0•05),andtheireffectswerebothinatime-dependentmanner.Ther
7、ewasanegativecorrelationbetweenPCNAandp53(r=-0.808,P<0•01).Conclusion Amnioticfluidcollectedongestationalday11,13,15and17caninhibittheproliferationofH22cellsandinducetheirapoptosis.Theearlierpregnancyandthelong
