血清饥饿处理对人角质形成细胞系HaCaT细胞自噬的调控效应研究

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1、分类号：R751密级：学位类别：科学学位口专业学位团学校代码：1062学号：2010602394学科门类：医学又滓酱科鼻峥TIANJINMEDlCALUNIVERSI丁Y硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：血清饥饿处理对人角质形成细胞系HaCaT细胞自噬的调控效应研究TITLETheeffectofserumstarvationonautophagyinhumankeratinocytecellline，HaCaTcells一级学科：临床医学二级学科：皮肤病与性病学论文作者：郭

2、新云指导教师：周之海主任医师天津医科大学研究生院二。一三年五月学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：轷日期侧声妒1徊学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关

3、数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。保密口，在——年解密后适用本授权书。本论文属于不保密匦才。(请在相对应的方框内打“√”)学位论文作者签名：壹塾墨日期：加f罗年，月确导师签名：．碰嗍们J了年珊日天津医科大学硕士学位论文中文捅姜细胞的自稳是通过对细胞内成分合成和降解的精确调节而实现。细胞内降解物质的途径有两类，一类是蛋白酶体途径，主要降解短寿命蛋白质，还有一类就是自噬途径，主要降解长寿命蛋白质及细胞器。自噬存在

4、于所有的真核细胞中，它对于保持细胞内环境稳定很重要。自噬可分为三类：巨自噬(macroautophagy)、微自噬(mieroautophagy)矛1分子伴侣介导的自噬(chapronemediatedautophagy)。巨自噬是胞浆内成份进行循环的主要途径，通常所说的自噬就是指巨自噬。饥饿是细胞自噬最为重要的诱导因素，然而目前饥饿对角质形成细胞自噬调控效应的研究资料较为缺乏。目的研究血清饥饿处理对人角质形成细胞系HaCaT细胞自噬的调控效应，并初步分析其分子机制，进而为通过调节细胞的自噬水平控制和治

5、疗皮肤病打下基础。方法对体外培养的HaCaY细胞进行血清饥饿处理，使用透射电镜观察超微结构改变，使用wegem．blot方法进行自噬标志性分子LC3II蛋白表达分析，进而对mTOR的蛋白表达及其ser2448位点磷酸化产物水平进行分析。结果电镜观察发现血清饥饿处理的细胞中有自噬体囊泡形成；western．blot显示LC3II蛋白表达较正常培养的细胞显著上调。血清饥饿处理的细胞中mTOR的ser2448位点磷酸化产物水平显著降低。结论血清饥饿处理可以诱导HaCaT细胞发生自噬，并且这种自噬活性的诱导可能

6、与自噬调控关键元件mTOR的ser2448位点磷酸化产物水平降低相关。关键词：血清饥饿；角质形成细胞；自噬天津医科大学硕士学位论文AbstractThecellhomeostasisismainialnedbyapreciselyregulatedbalancebetweensynthesisanddegradationofcellularcomponents．Theconstitutivedegradationofproteinsbytheproteasorne．However，thisprocess

7、islimitedtocytoplasmicshort,．1ivedproteins，andthemajorityofcellularcomponentsarelonglived．Therefore，theremustbeanotherrouteforlarge-scalemacromolecularrecycling．Thisrouteisautophagy．．Thisproeesshasbeenobservedinalleukaryoticcells，andplayanimportantrolein

8、themaintenanceofhomeostasis．Autophagypathwayscarlbeclassifiedintotheredifferenttypes：macroautophagy，microautophagyandchaperone-mediatedautophagy．Macroautophagyisthemajorlysosomalroutefortheturnoverofcytoplasmiccomponentsan