线粒体通透性转换对原代培养心肌细胞缺氧复氧损伤的影响

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1、徐州医学院硕士学位论文线粒体通透性转换对原代培养心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响姓名：商雄跃申请学位级别：硕士专业：麻醉学指导教师：曾因明;李敬远20070401徐州医学院硕士学位论文缩略词表缩略词CsACYPDIMMMPTmPTPVDACANTBdR英文全称央义芏称CyclosporinAcyclophilinDAbbI-eviationimlermitochondrialm锄1braIle中文全称环孢菌素A亲环素D线粒体内膜mitochon嘶alpenneabilitytransition线粒体通透性转换mitochondnalp锄eability仃锄sition线粒

2、体通透性转运孔道poreV0ltage-d印e11delltanionchamlal电压依赖性阴离子通道AdellinenucleotidetrallslocatI阿腺核苷酸转运蛋白benzodiazepinerec印tor苯二氮卓受体徐州医学院硕士学位论文论文声明论文独创性声明是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明并表示了谢意。作者签名：论文使用授权声明本人完全了解徐州医学院有关保留、使用学位论文的规定，即：学

3、校有权保留送交论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。保密的论文在解密后遵守此规定。作者签名：——导师签名：39徐州医学院硕士学位论文研究生论文审阅认定书在规定的学习年限内，按照研究生培养方案的要求，完成了研究生课程的学习，成绩合格；在我的指导下完成本学位论文，经审阅，论文中的观点、数据、表述和结构为我所认同，论文撰写格式符合学校的相关规定，同意将本论文作为学位申请论文送专家评审。导师签名：徐州医学院硕士学位论文线粒体通透性转换对乳鼠原代培养心肌细胞缺氧／复氧损伤的影响幸中文摘要目的：在

4、乳鼠原代培养心肌细胞上观察线粒体通透性转换在缺氧／复氧的不同阶段对心肌细胞损伤的影响。方法：新生SD大鼠心肌细胞原代培养48h后，采用三气培养箱建立缺氧／复氧(H—R)模型。将培养细胞按孔随机分为5组(n=6)并在心肌细胞缺氧／复氧的不同阶段用线粒体通透性转换(MPT)抑制剂CsA处理：对照组(contr01)，在37℃的CO：培养箱中孵育5h(95％空气+5％C02)；缺氧／复氧组(H—R)，缺氧(95％N2+5％C02，P02<30mmHg)3h、复氧(95％空气+5％C02)2h；缺氧前处理组(P—H)，缺氧前10min给予1uMCsA；复氧前处理组(P—R)，

5、复氧前10min给予1IlMCsA；复氧后处理组(A—R)，复氧后15min给予1pMCsA。复氧2h后，采用流式细胞术、westernblotting法分别观察心肌细胞凋亡、线粒体细胞色素c释放。复氧50min后，以Calcein染色心肌细胞，使用激光共聚焦显微镜观察mPTP的开放情况。结果：复氧2h后，对照组、缺氧／复氧组、缺氧前处理组、复氧前处理组、缺氧后处理组细胞凋亡指数分别为4．7±1．5、30．3±8．2、15．8±4．2、16．7±4．7、27．8±6．5。缺氧前处理组、复氧前处理组的细胞凋亡指数明显低于缺氧／复氧组(尸<0．05)，缺氧后处理组细胞凋亡

6、指数与缺氧／复氧组无明显差异；缺氧／复氧组、缺氧前处理组、复氧前处理组、缺氧后处理组细胞胞浆中细胞色素C的含量分别为314±79、186±46、194±52、289±69，明显高于对照组100(尸<0．05)，缺氧前处理组、复氧前处理组明显低于缺氧／复氧组(尸<0．05)，缺氧后处理组与缺氧／复氧组无明显差异(尸>0．05)。缺氧／复氧组、缺氧前处理组、复氧前2徐州医学院硕士学位论文木本课题受国家、省自然科学基金资助，课题编号为：30571782，05ⅪD32023处理组、缺氧后处理组细胞线粒体中细胞色素C的含量分别为28±6、84±21、74±19、34±8，缺氧／

7、复氧组、复氧前处理组、缺氧后处理组明显低于对照组100(尸O．05)。复氧50min后，对照组、缺氧前处理组、复氧前处理组Calcein保留在线粒体内，胞浆荧光强度较弱，缺氧／复氧组、缺氧后处理组Calcein从线粒体释放到胞浆，胞浆荧光强度较强。结论：(1)缺氧前和复氧前CsA处理都可以减轻缺氧／复氧损伤后的心肌细胞凋亡，产生明显的心肌保护作用；(2)CsA处理的心肌保护作用与抑制心肌细胞MPl'以及随后减少线粒体释放细胞色素C有