p物质对高糖孵育乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的影响

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1、万方数据分类号：R614学号：20111120564单位代码：10114密级：P物质对高糖孵育乳鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤的影响EffectofSubstancePonAnoxia··reoxygenationInducedInjuryinNeonatalRatCardiomyocytesIncubatedinHighGlucoseMedium研究生：指导教师：专业名称：研究方向：学位类型：所在学院：赵鑫郭政教授麻醉学伤害信号转导与器官损伤及保护科学学位山西医科大学麻醉学系中国·山西二O一四年五月二十八日万方数据学位论文独创性声明本人声明，所呈交的学位论文系在导师指导下本人独立完成的研

2、究成果。文中任何引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其它学位申请的论文或成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本文如违反上述声明，愿意承担以下责任和后果：1、交回学校授予的学位证书；2、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报：3、本文按照学校规定的方式，对因不当取得学位给学校造成的名誉损害，进行公开道歉。4、本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。论文作者签名：盘缸同期：碑年—厶月丛同‘学位论文版权使用授权书．本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文

3、的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山西医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单位仍然为山西医科大学。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名：指导教师签名：(本声明的版权≥啦年上月匹日边年．．厶月五日任何个人不得擅自使用)万方数据山两医科大学硕士学位论文目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1Abstract．

4、．⋯．．．．．．⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯．．．．⋯．．．．．．⋯⋯．⋯．⋯．⋯⋯．⋯．⋯．．⋯⋯．⋯⋯．⋯⋯．⋯．．．．．．．⋯⋯．．⋯．．．．．4实验一：体外培养高糖诱导心肌细胞损伤模型和缺氧／复氧损伤模型的建立⋯10实验二：体外培养大乳鼠心肌细胞NK一1受体表达的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19实验三：P物质对乳鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22实验四：P物质对高糖孵育心肌细胞缺氧／复氧损伤的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31实验五：P物质对高糖孵育心肌细胞缺氧／复氧后细胞内钙离子的影响⋯⋯⋯37结论与未来的工作⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．42综j签⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．43参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．60附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯72攻读学位期间发表文章情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．75致{射⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．76个人简介⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．77万方数据山西医科人学顾．L学位论文P物质预处理对高糖孵育乳鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤的影响摘要目的P物质(substanceP

6、，SP)预先给药对『F常乳鼠心肌细胞以及高糖孵育乳鼠心肌细胞缺氧／复氧(Anoxia．reoxygenation，A／R)损伤的影响。方法(1)体外培养乳鼠心肌细胞模型的建立及糖尿病模型和缺氧／复氧损伤模型的制作。选用1～3同龄的健康SD大鼠，雌雄不拘，用于心肌细胞体外培养模型的建立，采用免疫细胞化学SABC法进行心肌细胞鉴定；使用25mmol／L葡萄糖浓度的DMEM培养基孵育心肌细胞，制作糖尿病模型；将培养72h的心肌细胞更换缺氧液后置于密闭缺氧盒中培养3h模拟缺氧，随后更换培养液在正常培养箱中培养2h模拟复氧建立缺氧／复氧损伤模型，测定缺氧液及密闭缺氧盒中的氧分压验证缺氧情况。(

7、2)采用免疫荧光技术对心肌细胞速激肽1型受体(neurokinin．1receptor，NK一1)的分布表达进行定位。(3．)SP对乳鼠心肌细胞缺氧／复氧损伤的影响。取12：／L,D肌细胞随机分为4组(n=3)：对照组；A／R组，不加任何药物，只进行缺氧／复氧；SP+AR组，给予SP(10‘7mol／L)作用lh后进行缺氧／复氧；SP+D．SP+A／R组，给予SP(10‘7mol／L)和NK．1受体拮抗剂D．SP(10‘6mol／L)作用1h后进行缺氧／复