抗真菌药物敏感性试验

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1、万方数据中国感染与化疗杂志2{)09年3月2lJ日第9卷第2期ChinJInfectChemother，Mar．2009。V01．9。No．2143抗真菌药物敏感性试验刘锦燕，项明洁。，张华，陈华，倪语星一关键词：抗真菌药物敏感试验；念珠菌；丝状真菌；体内疗效中图分类号：R379文献标志码：A文章编号：1009-7708(2009)02—0143—05Antifungalsusceptibilitytesting·综述·LIUJin—yan，XIANGMing-jie。ZHANGHua，CHEN

2、Hua，NlYu—xing．(LuwanBranchofRuijinHospital，ShanghaiJiaotongUniversityMedicalSchool，Shanghai200020，China)近年来由于各种原因引起的真菌感染不断增多，抗真菌药物的耐药现象也愈益严重，因此抗真菌药敏试验日趋重要。随着对抗真菌药物耐药机制的认知，药效学和药动学理念的应用，抗真菌药敏试验从方法学、操作规范化以及对检测结果临床意义的解释上逐渐发展完善。新的技术不断涌现，提出新的思路和方法，极大丰富了抗真菌

3、药敏试验。一些药敏试验已应用于合理选择药物、临床上耐药菌株检测筛选等方面。本文主要对目前体外药敏试验方法做一综述。一、抗真菌药物体外敏感试验的常用方法(一)肉汤常量稀释法和微量稀释法由于不同实验室所用的试验方法不同，甚至同一方法操作者不同，以致抗真菌药敏试验结果的可重复性和一致性均较差，不利于临床合理选择抗真菌药物。NCCLS(后改称CLSI)从1992年开始就陆续制定了一系列针对抗真菌药敏试验的指导性文件，并经过数年的临床实践，于2002年公布了致病性酵母抗真菌药敏试验方案M27-A2(包括念

4、珠菌属和新型隐球菌)及产孢丝状真菌抗真菌药敏试验方案M38一A[I’2]。方案对培养基的成分和pH值、接种浓度、孵育温度、孵育时间、终点判读标准以及MIC折点基因项目：上海市卫生局科技发展基金资助项目(054118)l卢湾区卫生系统学科带头人培养计划资助．作者单位：上海市交通大学医学院附属瑞金医院卢湾分院放免检验科，2(10020；’检验科；一微生物科。作者简介：刘锦燕(1981--)，女，技师。学士，主要从事临床真菌药敏及耐药机制研究。通信作者：项明洁，E-mail：mjxiangl23456

5、@126．com。的意义等做了明确的规定，见表1。多个中心研究证明该方案重复性好，客观性强。2008年CI。Sl又分别推出了M27一A3／M27一S3和M38一A2新的抗真菌药敏试验方案[3“。M27-A3方案里受试的抗真菌药物中增加了棘白菌素(卡泊芬净、米卡芬净、阿尼芬净)，规范了其接种菌量、培养时间、结果阅读、判读标准等和质控株MIC值范围。方案指出由于棘白菌素对于念珠菌属有较高的抗菌活性，仅设定MIC≤2mg／L为敏感，首次提出MIC>2mg／L为非敏感(nonsusceptible，NS

6、)概念。M38一A2方案也作了以下调整：①系统性丝状真菌受试的抗真菌药物增加了棘白菌素(卡泊芬净、米卡芬净和阿尼芬净)。②增加了新的受试真菌皮肤癣菌(包括发癣菌属、小孢子菌属和表皮毛癣菌属)及其抗真菌药物(环吡酮、灰黄霉素、比萘芬、氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑)。③增加了新的参考菌株，并规范了MIC值和最低有效浓度(MEC)值判读结果(棘白菌素、环毗酮、灰黄霉素和特比萘芬)。(二)其他抗真菌药敏试验由于CLSI推荐的常量或微量稀释法操作比较烦琐，成本较高，不易在常规实验室推广。新的技术不断涌现，提

7、出新的思路和方法，极大丰富了抗真菌药敏试验。1．NCCLS纸片法：2004年NCCI。S批准了酵母的纸片扩散法敏感试验M44-A，但仅包括氟康唑和伏立康唑2种抗真菌药，2006年CLSIM44一S1又增添了伏立康唑的判定标准口]，当年在另一CLSl年度会议上又提出了泊沙康唑、卡泊芬净的质控株数值范围[6‘。近年来，国外不少学者还将该方案应用于检测丝状真菌的抗真菌药敏试验。多中心对555株丝万方数据144中国感染与化疗杂志2009年3月2【)日第9卷第2期ChinJlnfectChemother，

8、Mar．2009，V01．9，No．2状真菌作伏立康唑、泊沙康唑、伊曲康唑、两性霉素B和卡泊芬净药敏试验‘7‘。通过与M38一A肉汤稀释法比较，结果显示：①普通琼脂(MH)更利于丝状真菌的生长，抑菌圈较美蓝葡萄糖琼脂平皿(MGM)清晰而被使用。②曲霉属(烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉)等，在MGM更佳)。③与M38一A肉汤稀释法比较，泊沙康唑、伏立康唑、卡泊芬净符合率较高，为81％～96％(但不适用于天然耐药接合菌、多育赛多孢菌、镰刀菌属)；两性霉素B和伊曲康唑符合率为65％～88％，其中两性霉素B对曲