母猪的行为规癖及其与阿片受体基因关系的研究

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1、东北农业大学博士学位论文母猪的行为规癖及其与阿片受体基因关系的研究姓名：李剑虹申请学位级别：博士专业：动物营养与饲料科学指导教师：包军2003.6.1摘要行为规癖是动物表现的重复、不变的行为模式，并且不带有明显的目的性和功能，是动物行为的一种异常表现，多见于集约化生产条件下。许多学者认为行为规癖是动物的一种慢性应激综合症，并将其作为评价动物福利状况的指标。前人的研究结果表明，行为规癖的表现是遗传上的倾向性和环境影响共同作用的结果。目前对于母猪行为规癖发生的环境因素研究的比较全面和充分，遗传因素影响研究较少。本实验探索遗传因素对行为

2、规癖影响的可能性。f阿片受体属于G蛋白藕联受体超家族成员，广泛分布于中枢神经系统，对正常痛觉阐僚雌持和应激时的抗痛、正常情绪的维持和应激时情绪的调节以及“奖赏”行为与行为的自我强化起到重要作用。行为规癖作为受多基因座位和非遗传因素共同作用的数量性状，不仅受微效多基因的影响，也可能受一个或几个主基因的影响。本实验选择u和K阿片受体基因作为行为规癖性状的候选基因，通过行为观察试验和分子标记手段一单核苷酸多态性检测，并结合数量遗传学方法，计算和推断阿片受体基因变异对行为规癖表现的影响，探讨p和K阿片受体基因是否为影响行为规癖表现的主效基

3、因：并采用RT—PCR结合巢式PCR的方法检测候选基因在不同猪种的表达特性。实验结果如下：(1)限位栏环境下，母猪表现出多种类型的行为规癖，观察期内行为规癖(包括坐立、针对饲槽、啃栏和无食咀嚼)表现出随时间而增加的趋势。(2)产次对行为规癖的表现有一定影响。经产母猪的行为规癖表现(包括坐立、针对饲槽、啃栏和无食咀嚼)都显著高于初产母猪。(3)不同品种母猪在行为表现上存在差异。观察期内杜洛克品种趴卧行为、针对饲槽行为、啃栏行为和无食咀嚼行为都显著低于大白品种和长白品种，而站立和坐立行为显著高于大自品种和长白品种。大白品种的无食咀嚼行

4、为显著高于长白，大白品种和长白品种的其他行为比较结果在不同阶段表现不同。说明行为规癖表现的倾向性具有一定的遗传基础。(4)i．L和K阿片受体基因突变位点产生的不同基因型频率的分布与品种有关。本实验用8对引物通过PCR—SSCP的方法对猪的“阿片受体基因的5’UTR区域、整个编码区和37UTR区域进行扫描，在编码区发现5个多态位点(GenBank登录号：AF521309)。用3对引物通过PCR—SSCP的方法对猪的K阿片受体基因的部分编码区进行扫描，发现1个多态位点(GenBank登录号：AYl30756)。突变位点并没有导致氨基酸

5、的改变，属沉默突变。群体遗传学分析表明，基因型频率分布在不同品种间差异显著(P<0．01)。u阿片受体基因在杜洛克猪中趋于纯合保守，长白猪中变异也相对较小，而在大白猪中表现出较大的变异性。K阿片受体基因在杜洛克猪种中表现较大的变异性，在大自猪种中变异相对较小。(5)行为性状与基因型的相关分析结果表明，除坐立行为和针对饲槽行为外，其余4种行为性状(趴卧、站立、啃栏和无食咀嚼)分别与不同基因型相关，并且基因型与生理阶段对行为规癖的表现存在互作效应。结合不同基因型在不同品种中的分布规律，东jb农业大学农学博士学位论文推测p和K阿片受体鏊

6、因与行为规癣表现有重豢联系。(6)采用RT—PCR结合巢式PCR方法对i日龄的大自品种和杜洛克品种的阿片受体基觳mRNA羽表达进弦捡涮，发瑷》和K隧冀受体在中撼搴争经系绕呈现广泛螽不均～势布。”阿片受体基因在丘臆、下丘脑、桥脑、羲体、海玛、额叶皮质、纹状体和小脑都有袭达。x阿片受体基因在丘脑、下丘脑／桥脑、垂体、海马和小脑部位肖表达。不同簸嚣豹表达鬟在两个鹣耱闺存在弄同。≯关键词猪：行为规癣：阿片受体基因；单核餐酸多态性；mRNA表达祷楚lI摘要StudiesonStereotypedBehaviorofSowsandItsRel

7、ationshiptoOpioidReceptorGenesAbstractStereotypiesarerepeated，relativelyinvariablesequenceofmovements，whichhavenoobviouspurposeandfunction，oRenoccurinintensehusbandrysystems．Stereotypiesareconsideredbymanyscientistsasachronicstresssymptomandcriteriaformeasurementofgoo

8、dorpoorwelfare．PreviousstudiessuggestthatstereotyPYisaresultofinteractionbetweengeneticpredispositionandenvironmentaleffects