miR34b在白血病细胞株表达和启动子区CpG岛甲基化状态及其临床意义

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1、中国实验血液学杂志JournalofExperimentalHematology2015;23(5):1235－1239·1235·文章编号(ArticleID):1009－2137(2015)05－1235－05·论著·miＲ－34b在白血病细胞株表达和启动子区CpG岛甲基化状态及其临床意义1231*11郭健欣，周雅虹，官瑞婷，潘敬新，张学亚，钟金发123福建医科大学附属第二医院血液内科，血透室，检验科，福建泉州362000摘要目的:探讨miＲ-34b在白血病细胞株表达和启动子区CpG岛甲基化状

2、态及其临床意义。方法:选择10例非血液系统疾病患儿作为对照组，收集对照组骨髓细胞标本，另选择HL-60和K562白血病细胞株，采用荧光定量PCＲ检测对照组骨髓细胞、HL-60和K562细胞株的miＲ-34b相对表达量，并用甲基化特异性PCＲ检测各组miＲ-34b甲基化状态。用地西他滨处理HL-60和K562细胞株，用同样方法检测两种细胞株miＲ-34b相对表达量及甲基化状态。采用脂质体转染法将Has-miＲ-34b转染至K562细胞株，根据转染是否成功分为未转染组、阴性对照组和Has-miＲ-34

3、b转染组，记录各组培养后不同时间细胞的增殖情况，并计算增殖抑制率。结果:对照组miＲ-34b相对表达量为(5．23±0．75)，HL-60相对表达量为(0．05±0．01)，K562相对表达量为(0．04±0．01)，3组间比较差异具有统计学意义(F=44．812，P=0．000)。HL-60细胞株和K562细胞株分别在启动子区CpG岛存在甲基化状态，10例非血液系统疾病患儿骨髓细胞无甲基化现象。经过地西他滨处理后HL-60和K562细胞株miＲ-34b表达水平均显著增加(P＜0．05);加地西他

4、滨前后白血病细胞株启动子区CpG岛均存在甲基化，但是加药后甲基化明显减弱，提示地西他滨对启动子区CpG岛甲基化具有抑制作用。培养48、72、96和120h后Has-miＲ-34b转染组细胞增殖抑制率分别为24．8%、46．7%、33．6%和24．7%，细胞增殖率均显著低于未转染组和阴性对照组，组间比较差异均具有统计学意义(P＜0．05)。结论:白血病细胞株miＲ-34b启动子区CpG岛甲基化使其表达水平显著降低，这也是miＲ-34b对细胞株增殖抑制作用降低的原因;miＲ-34b也有可能是一种抑癌基

5、因参与调控白血病的发生、发展。关键词白血病细胞株;miＲ－34b;CpG岛甲基化;细胞增殖中图分类号Ｒ文献标识码Adoi:10．7534/j．issn．1009-2137．2015．05．003ExpressionandPromoterCpGIslandMethylationStatusofmiＲ-34binLeukemiaCellLinesandTheirClinicalSignificance1231*1GUOJian-Xin，ZHOUYa-Hong，GUANＲui-Ting，PANJing-

6、Xin，ZHANGXue-Ya，1ZHONGJin-Fa123DepartmentofHematology;DepartmentofHemodialysis;DepartmentofClinicalLaboratorialExamination，SecondAffiliatedHospi-talofFujianMedicalUniversity，Quanzhou362000，FuJianProvince，China*CorrespondingAuthor:PANJing-Xin，SeniorPhy

7、sician．E-mail:legend0194_cn@sina．comAbstractObjective:ToexploretheexpressionandpromoterCpGislandmethylationstatusofmiＲ-34binleukemiacelllinesandtheirclinicalsignificance．Methods:Atotalof10casesofnon-hematologicdiseaseswereselectedascontrolgroup，andthe

8、bonemarrowcellsofcontrolgroupandHL-60，K562cellswereselected;therelativeexpressionofmiＲ-34bwasdetectedinbonemarrowcells，HL-60andK562celllinesbyfluorescencequantitativePCＲ，andtheMiＲ-34bmethylationstatuswasdetectedbymethylation－specificPCＲ，theHL-