《细胞培养概述》PPT课件

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1、林红025-86862046五台校区1号教学楼147室细胞培养概述内容细胞培养基本理论细胞培养基本要求（无菌操作)细胞培养基本技术第一部分细胞培养基本理论细胞培养概述细胞培养简史细胞类型及其形态生长特点和生长过程一细胞培养概述医学中泛指的体外培养（InVitro）细胞培养（cellculture）模拟机体内生理条件，将细胞从机体中取出，在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。群体培养（massculture）将大量细胞置于培养瓶中，让其贴壁或悬浮生长，形成均匀的单层细胞或单细胞悬液。克隆培养（clonecult

2、ure）即将少数的细胞加入培养瓶中，贴壁后彼此间隔距离较远，经过繁殖每一个细胞形成一个集落，称为克隆。ht-1080人皮肤纤维肉瘤细胞株黑色素瘤细胞单克隆组织培养（tissueculture）指把活体的组织取出，分成小块，直接置于培养瓶底或通过胶原纤维血浆支持物的培养瓶底来进行培养。特点：组织不失散，细胞保持原有的组织关系。形成生长(cutgrowth)或形成由扁薄细胞构成的单层细胞培养物。在体外生长时，细胞间呈相互依存、互相影响的关系。器官培养（organculture）将活体中器官或器官一部分取出，在体外生长、生存，并使其保持器官原有的结构和功能特征的培养

3、。特点：培养的器官在合适的条件下能生长和分化，存活数周或1年。观察受限，只能用组织切片的方法观察或用透射电镜、扫描电镜观察。细胞培养定义优点：1．活细胞：同时、大量、均一性、重复性；2．可控制：各种物理、化学、生物等因素可调控；3．研究方法多样：倒置、荧光、电子、激光共焦显微镜、流式细胞术、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记；4．应用广：不同物种、年龄、组织，正常或异常（肿瘤）；缺点：人工所模拟的条件与体内实际情况仍不完全相同；当细胞被置于体外培养后，生活在缺乏动态平衡的环境中，时间久了，必然发生变化。二细胞简史动物细胞体外培养的历史可追溯到1907年，美国生

4、物学家Harrison在无菌条件下，以淋巴液为培养基成功地在试管中培养了蛙胚神经组织达数周，创立了体外组织培养法。在随后的近一个世纪里，随着细胞生物学、培养系统及培养方法等领城的不断丰富和完善，动物细胞培养技术得到了很大的发展。发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法，利用动物细胞培养生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等，已成为医药生物高技术产业的重要部分。大规模动物细胞培养在生物技术产业化进程中显示出强大的潜力。细胞培养简史Historicaleventsinthedevelopmentofcellculture1878:Claud

5、eBernardproposedthatphysiologicalsystemsofanorganismcanbemaintainedinalivingsystemafterthedeathofanorganism.1885:Rouxmaintainedembryonicchickcellsinasalineculture.1897:Loebdemonstratedthesurvivalofcellsisolatedfrombloodandconnectivetissueinserumandplasma.1903:Jollyobservedcelldivisi

6、onofsalamanderleucocytesinvitro.1907:Harrisoncultivatedfrognervecellsinalymphclotheldbythe'hangingdrop'methodandobservedthegrowthofnervefibersinvitroforseveralweeks.Hewasconsideredbysomeasthefatherofcellculture.1910:Burrowssucceededinlongtermcultivationofchickenembryocellinplasmaclo

7、ts.Hemadedetailedobservationofmitosis.Contd..1911:LewisandLewismadethefirstliquidmediaconsistedofseawater,serum,embryoextract,saltsandpeptones.Theyobservedlimitedmonolayergrowth.1913:Carrelintroducedstrictaseptictechniquessothatcellscouldbeculturedforlongperiods.1916:RousandJonesint

8、roducedproteolytice