葡萄糖氧化酶基因植物表达载体的构建及对马铃薯的初步转化

《葡萄糖氧化酶基因植物表达载体的构建及对马铃薯的初步转化》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、内蒙古农业大学硕士学位论文葡萄糖氧化酶基因植物表达载体的构建及对马铃薯的初步转化姓名：王静申请学位级别：硕士专业：植物病理学指导教师：刘正坪;张鹤龄20060401摘要葡萄糖氧化酶(GOD)可利用分子氧氧化B—D葡萄糖，生成6一葡萄糖酸内酯，进一步水解成葡萄糖酸和过氧化氢。过氧化氢在植物体抗病反应中起着第二信使的作用，它的大量存在能起到直接杀菌和抑菌的作用，在抗病中具有着重要的作用。本研究利用分子生物学的方法，pMDl8一T／GO质粒经HindIII．BamHl酶切取得的目的基因GO，与pROKII质粒经BamHl／$maI双酶切后得到的片断在T．。连

2、接酶的作用下，构建植物表达载体pROKII／GO，经PCR检测证实了植物表达载体pROKII／GO构建成功。利用冻融法将pROKII／GO转化农杆菌LBA4404感受态细胞，通过农杆菌介导的方法将G0基因转化马铃薯品种紫花白、天津克新一号、Favorita，得到愈伤组织，经PCR检测转化愈伤组织证实GO基因已转化马铃薯品种紫花白、天津克新一号愈伤组织中。关键词：葡萄糖氧化酶基因；植物转化载体构建；农杆菌；马铃薯转化；马铃薯晚疫病ThePlantExpressionVecto趔，。C二onst鳓：。ctionofGlucoseOxidaseGeneand

3、thePrimaryTransformationofPotato囊㈧．弧辩辩2’曩．i～o。≯：j曩jjj矗；、鼻ji㈡j：，，≯㈡㈡i”，滞、曩．1‘。j≯摹沁㈡篱。曩’移：蛰}．r卜j．j记玲·‘j登：j㈣i∞：；A。b二4t、≯h‘G‘to：．譬≯二1I：’’搿蝶

4、_≯洛．、；

5、§fli毛鹄毋Okia区菇IGbD》。{aj；(id矗捷：帛垂b：≥舒li曲茈：iiin蟊i：6^l如蕊赫西gioeoie：。啪ith02，}^埘d哟蚓瑚i斓孤acid、jradicak、延l汹bs”ahd；Itt蕾02、蛳师囊Fly．H2嘞}硪ias‘蛳￥isecond

6、aryH畔辩曼警鼹题吖婶?9焖ti99'挥冬p}印姆耪譬弦q熙sistance,it：．ean-stefitize一；甲flm对争嗡罂t的擎n：．曼删髅p臻n，jir弦奠，臻：i：ij。：．≯jj啭j∽iH：o≯、i—f溉㈡澄妻纛㈣j叠_j：．+：j!j_．i‘__：dT3h谝ep．M气hD銎；’T俘景亟w翥a芋sd爸i96es洋te‘d善b：y㈡Hj≯injd÷责[_[]溢,≮Ba；m㈠Hy、I_r奠e⋯s。tric¨ti_Iotni蔼en羞d；on—uclease,．an'ciit-targe'{plantvectorpi芝OKII：digeste

7、dbdy；jn_‘蔷妊“7ih≯。∞。l’：童翥≯爸6≮‘≯：㈠了{÷裔溢孑“五’'㈠浮⋯“7i4i甾矗!～≯‘虽赫’谶§；；精．督h矗：lh≯t。a㈡rge(gene·。

8、(南。；≮羞sl遣各蔷紊蔷it小蔼分滔菇；素浒；硒#嘻羹赫s参on。t{V-ectOr涞d《n两靠l增as‘e’：：一Thle’涎甜矗幽备蕊tv甜t浙‘pRO窿lI愆&瓣越j}}6d描tn甜?姆iPCRamplification．ThepROKII／GOwastransferredintoAgrobacteriumLBA4404co{mpetentceIIbvfreezeandme

9、ltmethodandidentified．ThepotatospeciesZihuabai，Tianjinkexin二i磐9：。1。,一,F。avoril拿器蟹暑t—ran．sf，o_rm：e．：dwit娶黪鹭÷簿O．?曼拿n+eby．≤÷婴冬ggPj粤m_medi㈡at¨edj?jge、ne+⋯tr‘a。ns—fer。，。an～d；矗矗2h。Pc莨am‘pli‘ficatio‘nconfirmedtheGOgenewastransformedofpotatospeciesZihuabai，TianjinkexinNO．1．Keywords：Gluc

10、oseoxidasegene；Plantexprseeionvector；Agrobacterium：potatoTransformation；PhytophorainfestansDirectedby：Prof．LIUZhengpingProf．ZHANGHeIingAppIicantforMasterdegree：WANGJing(pIantpathoIogy)(AgriculturalDepartment．InnerMongoliaAgriculturalUniversity．Huhhot010019．China)内蒙古农业大学硕士学位论文11引

11、言1．1马铃薯晚疫病研究进展1．1．1马铃薯晚疫病的发生、传播、危害1．1．1．1马铃薯晚疫病