茉莉花萜类合成酶基因JsTPS的克隆及其表达分析

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1、园艺学报,2016,43(2):356–364.ActaHorticulturaeSinica356doi:10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0803;http://www.ahs.ac.cn茉莉花萜类合成酶基因JsTPS的克隆及其表达分析1,*1,*211,**1,**俞滢,陈丹,孙君,吕恃衡,陈桂信,叶乃兴12(福建农林大学园艺学院/茶学福建省高等学校重点实验室,福州350002;福建省农业科学院茶叶研究所,福建福安355015)摘要:以双瓣茉莉花[Jasminumsambac(L.)Ait]花瓣为材料,采用RT-PCR和RA

2、CE技术相结合的方法,克隆了萜类合成酶基因(JsTPS)的全长cDNA,该cDNA全长为1884bp,其中ORF为1491bp,编码496个氨基酸的蛋白,分子量56989.7D,与原核表达结果一致。序列分析结果表明,该基因编码的氨基酸序列与油橄榄(Oleaeuropaea)的TPS2具有75%的同源性,同属于α-Farnesenesynthase分支。采用荧光定量PCR技术检测JsTPS在茉莉花开放过程中的表达量变化,结果表明,表达量在未开放时(18:00)最低,在半开放时(22:00)达到最高。关键词:茉莉花;萜类合成酶;实时荧光定量PCR;原核表达中图分

3、类号:S685.16文献标志码:A文章编号:0513-353X(2016)02-0356-09CloningandExpressionAnalysisofTerpeneSynthaseGenefromJasminumsambac1,*1,*211,**1,**YUYing,CHENDan,SUNJun,LÜShi-heng,CHENGui-xin,andYENai-xing1(CollegeofHorticulture,FujianAgricultureandForestryUniversity,KeyLaboratoryofTeaScienceatUniv

4、ersitiesin2Fujian,Fuzhou350002,China;TeaResearchInstitute,FujianAcademyofAgriculturalSciences,Fu’an,Fujian355015,China)Abstract:ThefulllengthcDNAofterpenesynthasegene(JsTPS)wasclonedbycombinationofRT-PCRandRACEfrompetalsofJasminumsambac.TheresultsshowedthatfulllengthcDNAcontained14

5、91bpincludingan1884bpORF,encodinga56989.7Dproteinwith496aminoacidswhosemolecularweightwasconsistenttothatofproductofthegenebyprokaryoticexpression;Theresultofalignmentofaminoacidshowedthatthegenehadahomologyof75%tothatofolive(Oleaeuropaea),belongingtoα-Farnesenesynthases;Quantities

6、ofthegeneweredetectedbyreal-timePCRinprocessofopeningofflower,theresultsshowedthattheexpressinglevelofthegenewasminimumat18:00whentheflowerswerenotopen,thenhadbeenincreasinguntilat22:00whentheexpressinglevelreachedtomaximumandtheflowerswasopening.收稿日期:2015–12–25;修回日期:2016–02–18基金项目

7、:福建省自然科学基金项目(2016J01110);福州市科技局市校合作项目(2013-G-103);福州市农业局2014年福州茉莉花茶产业提升项目(2014-3)*同等贡献者**通信作者Authorforcorrespondence(E-mail:ynxtea@126.com,guixinchen@126.com;Tel:0591-83735681)俞滢,陈丹,孙君,吕恃衡,陈桂信,叶乃兴.茉莉花萜类合成酶基因JsTPS的克隆及其表达分析.园艺学报,2016,43(2):356–364.357Keywords:Jasminumsambac;terpenesy

8、nthasegene;quantitativerea

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