茉莉花香气相关基因jsdxs及其启动子的克隆与表达分析

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1、园艺学报2014，41（6）：1236–1244http://www.ahs.ac.cnActaHorticulturaeSinicaE-mail:yuanyixuebao@126.com茉莉花香气相关基因JsDXS及其启动子的克隆与表达分析11,*1,2,*1311孙君，陈桂信，叶乃兴，吕恃衡，刘志钦，黄玮，林志达123（福建农林大学园艺学院，福州350002；福建农林大学茶叶科技与经济研究所，福州350002；福建农林大学生命科学学院，福州350002）摘要：以双瓣茉莉花瓣为材料，采用RT-PCR

2、和RACE技术相结合的方法，获得茉莉花香气形成限速酶即5–磷酸脱氧木酮糖合成酶（Deoxyoxylulose-5-phosphatesynthase，DXS）基因（命名为JsDXS）；采用染色体步移技术获得该基因的启动子序列；采用实时荧光定量PCR技术检测该基因在花瓣发育过程中的表达动态。结果表明，JsDXS全长cDNA为2505bp，其中ORF（OpenReadingFrame）为2145bp，编码714个氨基酸，含有TPP-DXS、TPP-PYR-DXS-TK-like和Transketolase

3、C等保守功能结构域；分离得到JsDXS基因上游调控序列745bp，其含启动子核心元件TATA-box及T/GBOXATPIN2（茉莉酮酸酯相关元件）、CIACADIANLELHC（生物钟相关元件）、MYCCONSENSUSAT（低温相关元件）等与花香形成相关的重要顺式作用元件；荧光定量PCR分析表明，该基因在18：00时表达量较低，随着时间的推移逐渐上调，到夜间22：00时表达量达到最高，逐渐又出现下调的趋势，直至凌晨2：00时表达量降到最低，说明该基因的表达受生物钟的控制。关键词：茉莉花；香气；5–

4、磷酸脱氧木酮糖合成酶；启动子；顺式作用元件；表达分析中图分类号：S685.16文献标志码：A文章编号：0513-353X（2014）06-1236-09CloningandExpressionAnalysisofDeoxyoxylulose-5-phosphateSynthaseGeneRelatedtoAromafromJasminumsambacandIsolationofItsPromoter11,*1,2,*131SUNJun，CHENGui-xin，YENai-xing，LÜShi-heng

5、，LIUZhi-qin，HUANGWei，andLIN1Zhi-da12（CollegeofHorticulture，FujianAgricultureandForestryUniversity，Fuzhou350002，China；TheInstituteofTeaScience3andTechnologyandEconomy，FujianAgricultureandForestryUniversity，Fuzhou350002，China；CollegeofLifeScience，FujianAg

6、ricultureandForestryUniversity，Fuzhou350002，China）Abstract：ThefulllengthcDNAsequenceofDeoxyoxylulose-5-phosphatesynthasegene（JsDXS）wasclonedfromJasminumsambacbyusingRT-PCRandrapidamplificationofcDNAends（RACE）method.Accordingtothe2505bpsequence，thepromot

7、erofJsDXSwasisolatedusingGenomeWalkingMethod.Thegeneexpressionpatterninbloomingwasanalyzedbythereal-timePCR.Genestructure收稿日期：2013–12–13；修回日期：2014–04–10基金项目：福建省科技厅区域重大项目（2010N3001）；福建农林大学园艺植物种质与高优生产技术创新团队项目（cxtd12013）*通信作者Authorforcorrespondence（E-mail：

8、ynxtea@126.com，guixinchen@126.com；Tel：0591-83795093）6期孙君等：茉莉花香气相关基因JsDXS及其启动子的克隆与表达分析1237analysisshowedthatthefulllengthcDNAcontaineda2145bpopenreadingframe（ORF），encodingaproteinof714aminoacid.Therewereseveralconserveddomains，suc