猪硫辛酸合成酶lias基因的克隆及其原核表达

《猪硫辛酸合成酶lias基因的克隆及其原核表达》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号河南农业大学硕士学位论文密级英文题目：CloningandProkaryoticExpressionofLipoicAcid．SynthaseLiasGeneofPorcine．——导专论文提交日期：学位授予日期：河南农业大学2013届硕士研究生学位论文致谢本研究是在导师王林枫副教授和鲁维飞老师的悉心指导下完成的，无论是在理论学习阶段，还是在论文的选题、设计、研究和撰写环节，我都得到了两位老师的悉心指导和帮助。王林枫副教授学识渊博，具有敏锐的洞察力，他严谨的治学态度、忘我的工作热情、缜密的思维方式以及探索真理的执着精神，使我在学术研究、生活态度、为人处事等方

2、面都受益匪浅。感谢恩师三年来在学习上的引导、督促，在科研素质、治学精神上的谆谆教诲，我将永远铭记于心。此外，我由衷的感激鲁维飞老师，他不仅在试验设计和试验操作中给予我了极大的帮助，还在思想、生活上给我以无微不至的关怀。值此论文完成之际，谨向两位老师致以最诚挚的谢意!本研究的主要工作在河南农业大学牧医工程学院农业部动物生化与营养重点试验室完成，衷心感谢杨国宇教授、杨国庆教授、王月影副教授、李宏基副教授对我工作上的支持、指导和生活上的关心。衷心感谢本教研室的韩立强、朱河水、钟凯、郭豫杰等老师对本课题提出的宝贵建议和热情指导!感谢鲁绍芳和孔江南两位试验员一直以来的支持，

3、感谢王丛梅和周博两位师姐在试验和生活中给予的大力帮助，感谢同届研究生姜士凯、张晓梅、韩慧华、曲晓丽、刘凤娟、刘国章等在试验和生活中竭力相助，感谢高会贞、贾艳、姚亚楠、杨树、张君、郭准、杨冉、王晓婷、张雪梅、韩莹倩、杜丽丽、柳如意、刘福涛等师弟师妹在试验和生活对我的关心和帮助!转眼间，三年的研究生求学生活即将结束，站在毕业的门槛上，回首往昔，奋斗和辛劳成为丝丝的记忆，甜美与欢笑也都尘埃落定。这三年的求学生活对于会成为我美好的回忆，导师的教导，实验室的同学们一起认真做实验的的场景，生活里大家相亲相爱，实验失败沮丧时有人安慰并帮忙分析失败的原因，在实验成功时一起分享喜悦

4、⋯⋯⋯从对这座城市的陌生到熟悉，从青涩到成熟，这三年的学习和生活，它给我带来太多的感动、感悟、成长，是我人生财富的重要积累。感谢我的室友史红鸽、史超文、韩露、赵迁迁，从不同的地方来到这个陌生的城市，有着不同的生活习惯，但是生活中在我们都相互包容，相互帮助和鼓励。现在大家就要各奔前程，难忘一起走过的岁月。感谢我的家人，最后，我要特别感谢我最亲爱的父母双亲。感谢你们二十多年的养育之恩，每当想起你们，任何感激的话都变得多余，沦为客套，心中只是暖暖的。我的每一点的收获和进步都凝聚着你们的心血和汗水。正是由于他们无私的爱、默默地支持和鼓励，才有了我的今天，他们在物质上的帮助

5、和精神上的鼓励，你们是我不断取得进步的永恒动力。最后，谨以此文献给所有关心支持我的老师、家人、同学和朋友!河南农业大学2013届硕士研究生学位论文目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．11文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．21．1硫辛酸的概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21．2硫辛酸合成酶Lias的概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．31．3丙酮酸脱氢酶复合体的概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52弓I言⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．63材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．73．1猪Lias基因的克隆、序列分析与结构预测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．73．1．1样品采集⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯73．1．2菌株和质粒⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯73．1．3主要仪器设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯73．1．4试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯73．1．4．1

7、试验常规试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．73．1．4．2SDS．PAGE电泳所用试剂及配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯93．1．4．3Westernblot所用试剂及配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯113．1．5猪Lias基因的克隆⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．113．1．5．1猪Lias基因克隆引物设计与合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯113．1．5．2猪肝脏总RNA的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．123．1．5．3RNA的检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯123．1．5．4RT

8、-PCR扩