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《水稻_石竹烯合成酶基因OsCAS克隆鉴定_原核表达及其遗传转化》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、浙江大学学报(农业与生命科学版)35(4):365～371,2009JournalofZhejiangUniversity(Agric1&LifeSci1)文章编号:100829209(2009)0420365207DOI:10.3785/j.issn.100829209.2009.04.002水稻β2石竹烯合成酶基因OsCAS的克隆鉴定、原核表达及其遗传转化1,21121戈林泉,周国鑫,王祺,祝树德,娄永根(1.浙江大学农业与生物技术学院昆虫科学研究所,浙江杭州310029;2.扬州大学园艺与植物保护学院,江苏扬州225009)摘要:为阐明水稻β2石竹烯在调节水稻、害虫
2、及其天敌相互关系中的作用,克隆鉴定了一个水稻β2石竹烯合成酶基因OsCAS,并对其原核表达与遗传转化进行研究.该基因的cDNA全长1731bp,包含一个1728bp的开放阅读框,编码一个由576个氨基酸组成的蛋白,预测分子量6615kDa.系统进化树分析表明,水稻OsCAS基因编码蛋白的氨基酸序列与同为单子叶植物玉米的β2石竹烯合成酶氨基酸序列同源性达99%,而与其他植物(拟南芥、青篙、黄瓜)的同源性仅51%.褐飞虱为害和茉莉酸处理能明显上调OsCAS基因的表达水平.同时原核表达了OsCAS基因,并利用农杆菌转化系统获得OsCAS基因过量表达和RNAi的水稻品系,为分析O
3、sCAS基因的生化与生物学功能奠定了基础.关键词:水稻;β2石竹烯合成酶;褐飞虱;OsCAS;原核表达;遗传转化中图分类号:Q962文献标识码:A1,21121GELin2quan,ZHOUGuo2xin,WANGQi,ZHUShu2de,LOUYong2gen(1.InstituteofInsectSciences,CollegeofAgriculture&Biotechnology,ZhejiangUniversity,Hangzhou310029,China;2.SchoolofHorticultureandPlantProtection,YangzhouUnive
4、rsity,Yangzhou,Jiangsu225009,China)Cloningandprokaryoticexpressionofricegeneencodingβ2caryophyllenesynthaseanditsgenetictransformation.JournalofZhejiangUniversity(Agric1&LifeSci1),2009,35(4):3652371Abstract:Toelucidatetheroleofβ2caryophylleneemittedfromriceplantsinmediatinginteractionsamo
5、ngrice,herbivoresandtheirnaturalenemies,ariceβ2caryophyllenesynthasegeneOsCASwascloned,expressedinE.coliandover2expressedorsilencedinriceplantsusinganAgrobacterium2basedtransformationsystem.ThegeneOsCAS,a1731bpcDNA,containsanopenreadingframeof1728bp,whichencodesaproteinof576aminoacidswith
6、acalculatedmolecularweightof6615kDa.PhylogenetictreeanalysisshowedthattheputativericeOsCAShadahighaminoacididentity(99%)tomaize(Zeamays)β2caryophyllenesynthase,whereasalowaminoacididentity(51%)tothoseinotherplantsincludingArabodopsis(Arabidopsisthaliana),Artemisia(Artemisiaannua)andcucumb
7、er(Cucumissativus).InfestationbyricebrownplanthopperNilaparvatalugens(St¼l)orjasmonicacidtreatmentenhancedsignificantlytheexpressionlevelsofOsCASgene.TherecombinantOsCASproteinwasexpressedinE.coliandricelineswithover2expressionorRNAi收稿日期:2008206204基金项目:国家自然科学基金资助项目(
