独活寄生合剂对佐剂性关节炎大鼠IL1、IL10、TNFα的影响

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2、论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：氓导师签名：锄沣衙u甜年上月必日中文摘要独活寄生合剂对佐剂性关节炎大鼠IL一1、IL．10、TNF．0[的影响摘要目的：类风湿性关节炎(RA)是一种以慢性、进行性、对称性、多关节炎为临床表现的自身免疫性疾病，最后可导致关节软骨和骨破坏。病理特征为炎症细胞浸润、滑膜增殖和血管翳形成、软骨和骨组织的破坏。其发病机制不明。大量资料表明，淋巴细胞、巨噬细胞和增生的滑膜细胞在发病机制中起着重要作用。尤其是这些细胞所释放的大量细胞因子在RA的发病中有重要的作用。细胞因子贯穿RA的发展始终。近年来研究发现，细胞因子网络调节失衡和RA的发病相关。既往有大量的临床试验证

3、明独活寄生汤对RA有治疗作用。本课题以佐剂性关节炎(AA)大鼠为动物模型，研究独活寄生合剂(DuHuoJiShengmixture，DHJS)对AA大鼠IL．1、IL一10、TNF．仪m清水平以及滑膜中表达水平的影响，探讨其疗效以及作用机制，为其在RA的治疗方面提供理论依据。方法：(1)选择雄性Wister大鼠在尾根部皮内注射完全弗氏佐剂(CFA)0．1ml，建立佐剂性关节炎大鼠动物模型，随机取10只相同部位注射等量的生理盐水作为正常对照。(2)注射后第18天，出现二次反应的大鼠随机分为模型组、甲氨喋呤组(MTX组)、独活寄生合剂组、甲氨喋呤联合独活寄生合剂组，每组10只，注射生理盐水大鼠作为

4、正常对照组。(3)测量大鼠足爪容积、体重后，各治疗组大鼠连续给药14天。治疗结束后第二天，测量大鼠足爪容积、体重，评价关节炎中文摘要指数和一般状态后，在3％苯巴比妥钠腹腔注射麻醉下腹主动脉取血分离血清备用。(4)用放射免疫的方法检测血清IL．1、IL．1o、TNF．仪水平。(5)显微镜下观察踝关节滑膜病理改变，评价软骨损伤程度，记录病理积分。(6)用免疫组化的方法检测IL-1、IL。10、TNF-ot在滑膜中的表达，采用计算机图像分析系统对其表达进行半定量分析。统计学处理：所有数据采用SPSS11．O软件进行统计学处理，结果用X±S表示。各组间均数比较采用单因素方差分析。结果：1和模型组比较，

5、独活寄生合剂组、甲氨喋呤组、甲氨喋呤联合独活寄生合剂组能显著改善大鼠的一般状况。模型成功建立后，模型组体重和其他三个药物干预治疗组明显低于正常对照组(PO．05)。差值比较：模型对照组的体重增长明显低于其他三个试验组(PO．05)，MTX联合独活寄生合剂组较MTX组体重增长明显，比较差异具有显著性(P

6、O．05)。治疗结束后，每个治疗组的关节炎指数和足爪肿胀度明显降低。联合用药组改善最明显。MTX组和独活寄生合剂组比较无显著性差异(P>O．05)。3模型对照组血清中IL．1、TNF．OL明显高于正常对照中文摘要组，而IL．10水平明显低于正常对照组。治疗结束后，和模型对照组比较，各治疗组血清中IL．1、TNF一0f水平明显下降，IL．10水平明显增高(P

7、水平明显高于MTX组，差异有显著·1'2--(PO．05)。联合用药组IL．1O水平较MTX组明显增高，两组比较差异显著(P<0．05)。4模型对照组中，滑膜组织中有大量的淋巴细胞浸润，滑膜细胞增殖，血管翳形成，软骨和骨质破坏。各治疗组在治疗结束后病理表现均有不同程度的改善。MTX组与独活寄生合剂组病理积分比较差异无显著