一株降胆固醇乳酸菌的筛选及其降解条件的研究

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1、生物工程粮油食品科技第22卷2014年第2期一株降胆固醇乳酸菌的筛选及其降解条件的研究田亚红，王丽萍，徐传远(河北联合大学生命科学学院，河北唐山063000)摘要:从酸奶中筛选得到高效降解胆固醇的乳酸菌株La－3，并对其胆固醇降解能力进行研究。通过单因素和正交实验，得到胆固醇降解最佳条件为培养时间72h、胆固醇浓度1．5mg/mL、接种量4%，胆固醇降解率达到51．2%。关键词:乳酸菌;胆固醇;筛选;降解中图分类号:Q93－335文献标识码:A文章编号:1007－7561(2014)02－0104－03Screenofastrain

2、ofcholesterol－degradinglactobacillusanditsdegradationconditionsTIANYa－hong，WANGLi－ping，XUChuan－yuan(CollegeofLifeScience，HebeiUnitedUniversity，TangshanHebei063000)Abstract:Astrainofefficientcholesterol－degradinglactobacillusLa－3wasscreenedfromyoghourt，anditscholesterol

3、－degradingabilitywasstudied．Theoptimumconditionfordegradationofcholesterolwereobtainedbysinglefactorandorthogonaltest，thatwas，culturefor72h，cholesterolconcentration1．5mg/mL，inoculumsize4%，andthecholesterol－degradationratewas51．2%．Keywords:lactobacillus;cholesterol;scre

4、en;degradation随着人们生活水平的不断提高，人们的膳食1．2培养基营养也日益增加，但随之而来的负面影响却是动1．2．1MＲS液体培养基脉粥样硬化、冠心病、高血压等心脑血管疾病的发葡萄糖20g，酵母浸膏5g，牛肉浸膏5g，蛋白［1－2］病率不断提高。这些疾病已经严重威胁到人胨10g，乙酸钠5g，柠檬酸三铵2．0g，磷酸氢二钾类的健康，血清中高胆固醇含量是引起众多心血2．0mL，吐温801mL，MnSO4·H2O0．25g，MgSO4·管疾病的重要因素之一，而食物胆固醇与血液中7H2O0．6g，水1000mL。胆固醇含量成正

5、相关，因此降低食品和人体血清1．2．2MＲS固体培养基中的胆固醇含量是目前科学研究工作的热点之1000mLMＲS液体培养基中加入碳酸钙5g、一。大量临床实验表明，服用乳酸菌及其制品具琼脂10g。有减少人体血清胆固醇含量、降低心脑血管发病［8］1．2．3高胆固醇培养基(MＲS-CHOL)［3－7］率的功效。1000mLMＲS液体培养基，胆固醇1．0g;超声本文旨在从食用酸奶中筛选乳酸菌，并在不同培波细胞粉碎机500W振荡乳化20min，调pH至7．0。养条件下对其进行胆固醇降解特性的研究，从而筛选1．3主要仪器出安全的、具有较强降解胆

6、固醇能力的乳酸菌株，为恒温摇床(HQ45):中科院武汉科学仪器厂;高开发具有降低胆固醇功能的发酵食品提供一定的理速离心机(LG15－W):北京医用离心机厂;电热恒论依据。温培养箱(DNP－9082):上海精宏实验设备有限公1材料与方法司;722N可见分光光度计:上海光谱仪器有限公司;1．1乳酸菌超声波细胞粉碎机(L96－IIL):上海皓庄仪器有限从市售盒装酸奶中分离得到。公司。1．4方法1．4．1菌株的筛选收稿日期:2013－07－29作者简介:田亚红，1979年出生，女，河北无极人，讲师．将少量酸奶按梯度稀释分离法涂布于MＲS固1

7、04粮油食品科技第22卷2014年第2期生物工程体培养基平板中，37℃恒温培养72h，，挑取融钙圈直径最大的菌落La－3株，反复纯化至纯种，观察并记录其菌落形态，经革兰氏染色和镜检后，观察其菌［9］体形态。1．4．2胆固醇降解率的测定胆固醇标准曲线的绘制:硫酸铁铵显色剂分光［10］光度法。［11－12］发酵液总胆固醇的测定:取培养液0．2mL，加入无水乙醇4．8mL，静置10min，3000r/min离心5min。准确称取上清液2mL，加入2mL硫酸图2培养时间对菌株降解胆固醇的影响2．3．2胆固醇浓度对菌株降解胆固醇的影响铁铵显色

8、剂溶液，同时做空白对照，在波长560nm将筛选到的乳酸菌株La－3分别接种到胆固醇处测定吸光度。按测得的值，从标准曲线查得相应浓度为0．5mg/mL、1．0mg/mL、1．5mg/mL、2．0的胆固醇含量。以胆固醇降解率表示菌株对胆固