猪主要养分生物学效价仿生评定方法的建立与应用-张宏福

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1、1猪主要养分生物学效价仿生评定方法的建立与应用中国农业科学院北京畜牧兽医研究所2013-1-19张宏福2021/7/15http://www.klan.net.cn2一、项目背景及主要研究内容二、课题主要研究进展1.猪消化液的生物学特性研究2.猪模拟消化液的制备方法3.猪饲料消化率仿生法评定操作技术规程4.仿生法评定猪饲料养分消化动力学的研究5.仿生法评定猪饲料有效磷的研究三、下一步工作计划目录2021/7/15http://www.klan.net.cn3一、项目背景及主要研究内容饲料生物学效价仿生评定方法研究动物指标内容仪器

2、定型：以现有3台为基础鸭有效能仿生试剂：试剂的制作方法、保存稳定性缓冲液：配制方法鸡氨基酸消化参数：时间、剂量操作规程：全套使用规程猪有效磷适用性：谷实、饼粕、动物蛋白、粮副可靠性：重演性、单位比对、动物试验结果比对科技部创新方法专项于7.19日通过验收，取得“原创性成果”http://www.klan.net.cn71.猪肠道消化生理的研究通过在猪小肠部位安装瘘管采集猪小肠液，研究猪活体肠道动态食糜流量及其消化液在不同外因条件下的酶活变异规律。猪模拟小肠液的研制配制试剂盒仿生消化操作规程的建立仿生消化仪评定猪饲料养分生物学效价参

3、数，建立操作规程猪饲料能量、氨基酸、磷仿生消化评定方法的研究利用仿生仪建立猪饲料能量、氨基酸和磷的消化评定方法，并和生物学法相对比，实现对猪饲料养分生物学效价的预测和评定。猪主要养分生物学效价仿生评定方法的应用本课题主要研究内容2021/7/15http://www.klan.net.cn8二、主要研究进展http://www.klan.net.cn9日粮蛋白来源蛋白水平测定指标目的1豆粕17%胰蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性；Na+、K+、Cl+、Ca2+、Mg2+浓度猪小肠消化环境信息的获得模拟小肠液的配制依据2豆粕14

4、.5%3豆粕、棉粕、菜粕17%4豆粕、棉粕、菜粕14.5%（一）猪消化液的生物学特性研究1、日粮蛋白来源和水平对生长猪空肠液组成的影响10日粮蛋白质来源和水平对空肠液中的胰蛋白酶、糜蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶的活性无显著影响（p>0.05）；日粮蛋白来源和水平对空肠液主要消化酶活性的影响日粮蛋白来源和水平对空肠液主要离子浓度的影响11日粮蛋白质来源和水平对空肠液中5种主要离子（Na+、K+、Cl+、Ca2+、Mg2+）的浓度无显著影响（p>0.05）；http://www.klan.net.cn122.日粮粗纤维水平对生长猪盲肠液组成

5、的影响日粮粗纤维水平测定指标方法目的13.05%纤维素酶活性；Na+、K+、Cl+、Ca2+、Mg2+浓度；pH生长猪盲肠安装瘘管猪盲肠消化环境信息的获得大肠消化液的配制依据23.49%34.47%13饲料纤维素酶活（U/mL）pH低纤维日粮0.079±0.0126.33±0.08b中纤维日粮0.084±0.0096.23±0.07b高纤维日粮0.066±0.0066.71±0.09a均值0.0766.42SEM0.0260.56方差来源,p值饲料0.24<0.01期0.430.43试猪<0.010.04日粮粗纤维含量和试验期对猪

6、盲肠液中纤维素酶活和pH无显著的影响（p>0.05）日粮纤维水平对盲肠纤维素酶活性的影响14日粮纤维水平对盲肠主要离子浓度的影响日粮纤维含量对猪盲肠液中钾、氯、钙、镁浓度有极显著影响（p<0.01）。各处理间钠离子浓度差异不显著；低、中纤维日粮组钾离子浓度显著高于高纤维日粮组；低纤维日粮组氯离子浓度显著低于高纤维日粮组；低纤维日粮组钙离子浓度显著高于中、高纤维日粮组；低纤维日粮组镁离子浓度显著低于中、高纤维日粮组（p<0.05）。151.体外仿生消化模拟消化液配制参数胃期小肠期大肠期消化酶种类活性胃蛋白酶737.5U/mL淀粉酶2

7、21.43U/ml脂肪酶3.34U/ml胰蛋白酶8.68U/ml糜蛋白酶69.10U/ml纤维素酶0.076U/mL缓冲液离子种类和浓度Na＋80.6mmol/LK＋6.0mmol/LK+14.95mmol/LCL-116.69mmol/LPBS0.2MK+11.08mmol/LCL-25.12mmol/LPBS0.2MpH2.06.446.42（二）猪模拟消化液的制备方法16生理指标模拟消化液内源肠液提纯酶商品酶肠液消化酶提纯方法：直接冻干法饱和硫酸铵法2.模拟消化液试剂盒的标准化研究试剂盒批量生产http://www.klan

8、.net.cn17方法重复胰蛋白酶糜蛋白酶脂肪酶淀粉酶总蛋白饱和硫酸铵法ammoniumsulfatemethod157.59±1.7065.32±3.7098.14±4.0974.84±12.5759.39±1.77266.97±6.4061.3