猪应激综合征hrm检测方法的建立与应用

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1、爱．Ｖ备愛分类号Ｑ７８＾学号？，ｆ齡、香裘素未聲言．斷．全日制硕±学位论文也猪应激综合征ＨＲＭ检测方法的建立与应用姓名；吴笑音指导教师：贾广乐副研究员张映教挺学科专业：生物化学与分子生物学培养单位：动物科技学院中国？山西？太谷二〇－五年六月ＳｈａｎｘｉＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｇｙＦ山－１村ｍｅＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅＤｉｓｓｅｉｉ：ａ村ｏｎｇＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＨＲＭｆｏｒｄｅｌｅｔｉ

2、ｎｇｏｒｃｉｎｅｓｔｒｅｓｓｓｎｄｒｏｍｅｐｙＮａｍｅ：ＸｉａｏｙｉｎＷｕＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：Ａｓｓｏｃｉａｔ；ｅＰｒｏｆ．ＧｕａｎｌｅＪｉａｇＰｒｏｆ．ＹｉｎｇＺｈａｎｇＭａｏｒ：Ｂｉｏ油ｅｍｉｓｔｒａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｊｙｇｙＴｒａｉｎｉｎｇＵｎｉｔ：ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＶｅｔｅｒｉｎａｉｙＭｅｄｉｄｎｅＴａｉｕＳｈａｎｘｉＣｈｉｎａｇｔＪｕｎｅ２０１５，学位论文原创性声明本人郑重声明：所提

3、交的学位论文，是在导师指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中己注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文研究做出过重要贡献的个人和集体已在文中ｋ乂明确方式标明。，均本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签違（亲笔）：襄黎Ｉ年月！＾日学位论文版枚使用援权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定。即学位论文的知识产权属山西农业大学；同意学枚保留并向国家有关部口或机构送交论文的原件、复印件和电子版；允许论文被查阅和借阅；本人授

4、权山西农业大学可从将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可ａ采用影印、缩印或担描等复制手段保存、汇编学位论文。作者签違（亲笔）：罢聲Ｉ２０伴《月ｆ《曰导师签違（亲笔）：憂ｆ穿、年＾月八曰目录摘要１刖胃２文献综述３１猪应激综合症（ＰＳＳ）的研究进展３１．１猪应激综合症（ＰＳＳ）致病基因的定位３１．２猪应激综合症（ＰＳＳ）的致病机理４１．３氣烧基因的危害５１．３．１氣焼基因对肉质的影响５１．３．２氣婉基因对猪繁殖性能的影响５１．４猪应激综

5、合症检测方法的研究进展６１．４．１氣焼测验６１．４．２ＣＫ血清测定法７１．４．３血型与同工酶型鉴别８１．４．４探针检测法８－１．４．５ＰＣＲＲＦＬＰ法８－１．４．６ＰＣＲＳＳＣＰ法９２离分辨率烙解曲线技术简介９２．１ＨＲＭ的技术原理１０２．２高分辨率烙解曲线的技术基础及对硬件要求１０２．２．１对仪器设备自身温差的要求１０２．２．２对仪器设备温度分辨率的要求１１２．２．３ＰＣＲ体系与条件的要求１１２．３ＨＲＭ小片段法及应用１１２．４Ｈ

6、ＲＭ非标记探针法及应用１２一实验Ｃ／Ｃ型和Ｔ／Ｔ型两种标准质粒的扩大培养１４１实验材料与试剂１４１．１样品１４１．２试剂及试剂盒１４１．３主要试剂的配制１４２方法１５２．１标准质粒的扩大培养１５２．２标准质粒的提取１５２．３杂合型质粒的构建１６３结果与分析１６４小结１６实验二ＰＳＳ艮ＹＲｌ基因ＨＲＭ小片段检测方法的建立１７１实验材料与试剂１７１１７．１质粒１．２样品１７１１７．３试剂及试剂盒１．４主要试剂的配制１７２方法

7、１７２．１猪尾组织ＤＮＡ的提取及检测１７２．２引物的设计合成１８２．２．１引物的设计与合成１８２．２．２ＨＲＭ小片段法目的基因的扩増１９２．３ＨＲＭ小片段法检测ＰＳＳ方法的初步建立２０２．３．１ＰＣ民反应条件的优化２０２．３．２ＨＲＭ的分型过程２１２．４猪基因组样品ＤＮＡ的检测２１３结果与分析２１３．１猪基因组ＤＮＡ电泳结果２１３．２ＰＣＲ扩增电泳结果２２３３退火温度的优化结果２２３．４引物的优化结果．．．．．２３３２３．５样品检测

8、结果４小Ｓ２５实验ＨＰＳＳＲＹＲ１基因ＨＲＭ非标记性探针检测方法的建立２６６１实验材料及试剂２１．１质粒２６１．２样品２６６１．３试剂及试剂盒２１．４主要试剂的配制２６２方法２６２．１引物与探针的