黄芪多糖对孕早期蜕膜Toll样受体表达与功能的影响

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1、浙江人学硕上学位论文摘要黄芪多糖对孕早期蜕膜Toll样受体表达与功能的影响浙江大学医学院硕士研究生导师妇产科学刘永林黄荷凤教授中文摘要Toll样受体(Tolllikereceptor，TLR)是近年来在人体内发现的一种I型跨膜受体，可以识别保守的病原体相关分子模式(pathogen．associatedmoleculepattem，PAMP)感知病原微生物的存在，通过细胞信号转导，诱导细胞合成分泌各种细胞因子，如TNF．O【、IL．6等，启动机体先天性免疫应答。TLR广泛地分布于人体各类腔道组织细胞，如呼吸道、肠道等。在生殖道各类细胞也发现有TLR的表达，

2、提示TLR可能参与了母胎免疫微环境的调节。黄芪多糖是一种可以调节TNF．Ct、IL．6分泌的中药，但机制不明。我们设计了体外试验，观察黄芪多糖通过孕早期蜕膜细胞TLR途径对TNF．0【、IL．6分泌的影响。目的观察黄芪多糖通过孕早期蜕膜TLR途径对IL．6、TNF．a分泌的影响方法1、采用RT．PCR方法检测孕早期蜕膜TLR4、TLR9mRNA的表达2、取孕早期蜕膜进行原代培养，分为三组，PBS对照组、LPS刺激组和CPG-ODN柬]激组，,用0mg／L、25mg／L、50mg／L、125mg／L、250mg／L黄芪多糖作用三组蜕膜细胞48d,时，再分别用

3、PBS、LPS和CPG．ODN分别处理24／]x时，采用酶联免疫吸附试验方法检测上清液TNF．0【、IL．6的分泌，用流式细胞仪检测蜕膜细胞TLR4、TLR9的表达。结果ll浙江人学硕}：学位论文摘要1、通过RT．PCR方法发现孕早期蜕膜表达TLR4、TLR9mRNA2、孕早期蜕膜原代培养，光镜下细胞呈梭形或多角形，核大而圆，位于细胞中央。胎盘泌乳素免疫组织化学染色，95％细胞呈阳性。3、用LPs刺激细胞后，TLR4表达上调，P目25mg／L、50mrdL、125mg／L、250mg／L黄芪多糖预处理蜕膜细胞48小时后，250mg／L黄芪多糖可以抑制TLR

4、4表达的上调，但25mg／L、50mg／L、125mg／L黄芪多糖不能抑制LPs刺激引起的TLR4表达的上调；用CPG．ODN刺激蜕膜细胞，TLR9表达上调，)B25mg／L、50mg／L、125mg／L、250mg／L黄芪多糖预处理蜕膜细胞48小时后，TLR9表达无显著性变化。4、用LPS刺激细胞后，IL．6、TNF．0t的分泌显著增加，用25mg／L、50mg／L、125mg／L、250mg／L黄芪多糖预处理蜕膜细胞48小时，250mg／L黄芪多糖可以抑制LPS．束《激蜕膜细胞引起TNF．0t分泌的增加，25mg／L、50mg／L、125mg／L黄芪多

5、糖无此作用，但25mg／L、50mg／L、125mg／L、250mg／L黄芪多糖均可以引起IL-6分泌的增加。用CPG．ODN刺激蜕膜细胞，IL．6分泌显著增加，但TNF．Q分泌无显著性变化，25mg／L、50mg／L、125mg／L、250mrdL黄．芪多糖对CPG．ODN．；Ii4激蜕膜细胞引起IL．6分泌增加无显著影响，TNF．0【分泌也无显著变化。5、25mg／L、50mg／L、125mg／L、250mrdL黄芪多糖作用蜕膜细胞前后，蜕膜TLR4、TLR9的表达及IL．6、TNF—a的分泌无显著性变化。结论Toll样受体功能性表达于孕早期蜕膜，配体

6、刺激后，TLR4、TLR9介导蜕膜分泌TNF．仅、IL．6增强，提示TLR参与母胎界面免疫微环境的调节。黄芪多糖可以选择性引起配体刺激后蜕膜TLR表达及细胞因子分泌的改变，这种调节作用呈剂量依赖方式，提示黄芪多糖可以通过改变蜕膜TLR介导的免疫功能影响免疫微环境。关键词黄芪多糖、TLR、IL．6、TNF—Gt、蜕膜、自然流产III浙江人学硕．1：学位论文英文摘要EffectsofAstragalusPolysaccharideOnExpressionOfTollLikeReceptorInHumanDecidualCellsInEarlyPregnancy

7、DepartmentofGynecologyandObstetricsZhejiangUniversitySchoolofMedicineM．phil．CandidateLiuYongLinSupervisorProf．HuangHeFengAbstractTLRproteinsareafamilyoftypeItransmembranereceptorsplaysaninstructiveroleininnateimmuneresponsesagainstmicrobialpathogens．TLRsrecognizespecificmolecularp

8、atternsfoundinabroadrangeofmicrob