血管紧张素17对TGFβ1诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

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1、血管紧张素．(1-7)对TGF-13。诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响摘要目的：观察血管紧张素．(1．7)对TGF．pl诱导幼年大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响，并探讨其是否通过cAMP／PKA通路进行介导抗纤维化作用。方法：1．细胞分离培养与鉴定：用酶消化法分离细胞，差速贴壁法纯化获得心室肌成纤维细胞为材料，用光学显微镜和免疫细胞化学的方法鉴定细胞。2．检测方法：WST-1比色法测定细胞增殖情况，放射免疫法测定ⅡI型胶原前体序列(PCIII)的含量。3．实验分组：根据不同药物及药物不同浓度，将实验共分四部分，第一部分：观察An

2、g．(1．7)对基础状态下的心肌成纤维细胞是否有影响。共分5组：不同浓度(10-9．10击M)Ang．(1．7)组和空白对照组。第二部分：观察Ang．(1．7)对TGF．pl诱导下对心肌成纤维细胞的影响。空白对照组，TGF．pl组，不同浓度的Ang．(1-7)(10-9．10～mol／L)+TGF．Dl组。第三部分：H．89对基础状态下心肌成纤维细胞的影响。空白对照组，Ang．(1．7)组，H．89组，H．89+Ang．(1-7)组。第四部分：H．89对TGF．Bl诱导下对心肌成纤维细胞的影响；分5组。空白对照组，TGF—pl组，TGF—pl组

3、+H-89组，TGF．pl+Ang-(1—7)组，TGF．pl+Ang．(1—7)+H．89组。4．数据处理：用SPSSl3．0软件包；细胞活度OD值(吸光度)数据用均数±标准差(x±s)表示，单因数方差分析进行统计学处理，两两比较采用LSD法，检验水准为P<0．05有统计学意义。结果：1．培养的细胞经过光学显微镜和免疫细胞化学的方法鉴定为心肌成纤维细胞，纯度95％以上。2．Ang．(1．7)在基础状态下呈浓度依赖性抑制心肌成纤维细胞增殖和PCIII的合成。Ang．(1．7)各浓度组(10-9．10。6mol／L)OD值及PCIII的合成明显高

4、于空白对照组(PO．05)。2)基础状态下，H．89能阻断Ang．(1．7)对细

5、胞增殖和胶原PCⅢ合成抑制作用，与Ang．(1．7)组比较差异明显P<0．05，与空白组对照比较无明显差异。结论：1．Ang．(1．7)对基础状态下心肌成纤维细胞增殖和胶原合成有抑制作用。2．Ang．(1．7)对TGF．pl诱导的心肌成纤维细胞的增殖和胶原合成有抑制作用。3．Ang．(1．7)对TGF．pl诱导的心肌成纤维细胞的增殖和胶原合成的抑制作用可能是通过cAMP／PKA通路介导的。关键词：血管紧张素(1．7)；转化生长因子B；心肌成纤维细胞；增殖；胶原；H．89；EffectofAng一(1·7)ontheproliferationan

6、dsynthesisofcollageninculturedratcardiacfibroblastinducedbyTGF—plAbstract：objective：ToinvestigatetheroleofAng一(1—7)intheproliferationandsynthesisofcollageninculturedratcardiacfibroblastinducedbyTGF—pl，andtoevaluatewhetheritspossibleintracellularsignalingpathwayismediatedbycA

7、MP／PKA．Methods：Neonatalratcardiacmyofibroblastswereisolatedandcultureinvitro．TheinfluenceofAng一(1·7)oncardiacmyofibroblastsproliferationwasdeterminedbyWST-1assay．TheproteincontentofPCIIIintheculturedmediumoftreatedgroupsandcontrolgroupswasdeterminedbyradioimmunoassay．Theexpe

8、rimentwasdividedintofourparts．Thefirstpart，therewerefivegroups：blankcontrol