资源描述：
《pparβδ激活对大鼠心肌成纤维细胞胶原表达和细胞增殖的影响(可编辑)》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、PPARβδ激活对大鼠心肌成纤维细胞胶原表达和细胞增殖的影响中山大学博士学位论文PPARβ/δ激活对大鼠心肌成纤维细胞胶原表达和细胞增殖的影响姓名:张会杰申请学位级别:博士专业:药理学指导教师:刘培庆20070528/激活对大鼠心肌成纤维细胞胶原表达和细胞增殖的影响专业:药理学博士生:张会杰导师:刘培庆教授中文摘要高血压病是一种常见病、多发病,极易导致心、脑、肾等靶器官损害,严重威胁人类的健康。其中,由心脏成纤维细胞。增殖和胶原表达过多所导致的心肌纤维化是高血压心室肥厚由代偿向失代偿转化的重要病理过程,是引发心力衰竭的核心环节。目前心肌
2、纤维化的确切发病机制并不十分明确,但近年来心肌纤维化的治疗已成为国内外研究的热点。其中,过氧化物酶体增殖剂激活型受体?,与心肌纤维化的关系越来越受到人们的关注。和鼬激活可以抑制心肌纤维化,但与它们结构和功能相类似的/对心肌纤维化的作用却未见报道。本研究旨在细胞水平模拟心肌纤维化,探索/激活对血管紧张素Ⅱ,诱导的成年大鼠胶原表达和细胞增殖的影响及其可能的机制,为心肌纤维化的治疗提供新的作用靶点,以有利于抗心肌纤维化药物的研发。第章成年大鼠心肌成纤维细胞/的表达情况目的:/体内分布广泛,其中心脏/表达水平较高。心脏主要由心肌细胞和组成。心肌
3、细胞表达邸,,但是否表达邛/至今尚未皇些盔堂蔓主堂垡堡塞坠垦堕燮煎墅盔基:坚墼盛堑丝塑堕堕堕耋垄塑垫墼塑堕丛墅堕见报道。本研究体外成功地培养了成年大鼠,并在此基础之上探讨成年大鼠是否表达/。方法:.采用胶原酶一胰酶一胶原酶消化和差速贴壁法分离成年大鼠。倒置显微镜和免疫细胞化学染色鉴定细胞,同时绘制细胞生长曲线了解生长特性。.以乳鼠心肌细胞作为阳性对照,采用和研究成年大鼠是否表达/。.从水平研究中个亚型的表达情况。结果:.采用胶原酶~胰酶一胶原酶法分离细胞,细胞收率高,而且培养成本较低。倒置显微镜,原代培养的呈梭形或不规则三角形,胞质淡折
4、光性强,细胞核较大,呈椭圆形,无自发性搏动。培养的细胞波形蛋白染色阳性,Ⅷ因染色阴性,Ⅱ.染色阴性,符合染色特征,细胞纯度大于%。第.代的生长曲线无明显差异,适于开展细胞实验。.成年大鼠在和蛋白两个水平都检测到邓/表达,而且的/表达量较心肌细胞低.。.同时表达个亚型,/和表达量较高,而表达量最低.。结论:我们建立的成年大鼠培养方法成本较低,细胞收率较高,细胞纯度高,第代细胞适于开展相关实验。成年大鼠表达/,而且在个亚型中表达量较高。表达邸/是开展后续实验的前提和基础。关键词:细胞培养;/;受体表达;第章对心肌成纤维细胞胶原表达和细胞增殖
5、的影响目的:和激活可以抑制心肌纤维化,但与它们结构和功能相类似的诱导的成/对心肌纤维化的效应却未见报道。本研究成功地建立了年大鼠胶原表达和细胞增殖的模型,并在此基础之上探讨岬激动剂对细胞胶原表达和细胞增殖的影响。方法:.摸索四年大鼠胶原表达和细胞增殖的量效和时效关系,建诱导的胶原表达和细胞增殖模型。立.利用法探索成年大鼠使用的安全剂量范围。.采用、掺入和.掺入等方法,探讨对诱导的成年大鼠胶原表达、胶原合成和细胞增殖的影响。结果:.作用于,可以浓度依赖和时间依赖地促进表达型胶原。..作用于.,可以浓度依赖和时间依赖地增加对.的摄取量。.对
6、的细胞数无影响俨..对照组,而¨的明显地降低的细胞数尸..对照组。..小预处理,可以浓度依赖性地抑制诱导的胶原表达和胶原合成,而本身对细胞的胶原表达和胶原合成的无影响。“浓度依赖性地抑制诱导的摄取,而不影响细胞对.的基础摄取量。结论:成功建立诱导的胶原表达和细胞增殖的细胞模型。/激动剂可以抑制诱导的细胞胶原表达和细胞增殖,其中抑制细胞胶原表达的效应与其降低细胞胶原的合成有关。关键词:;胶原表达;细胞增殖;;细胞培养第章/激活介导对心肌成纤维细胞的效应目的:可以抑制诱导的细胞胶原表达和细胞增殖。的效应除町能通过激活邮来实现外,也町能通过调
7、节的表达量或通过不依赖于/的途径来实现。本研究观察了对/表达量的影响,并利用干扰,来探索的作用是否依赖于阶。方法:.采用和探讨是否影响/的表达量。.以作为阴性对照,对针对/的、和转染。转染细胞后,和检测各组细胞邸/的表达水平,筛选有效干扰序列。.有效于扰序列抑制细胞/表达后,采用、.诱导的细胞胶原表达、胶原合成和?掺入等方法研究对和细胞增殖的效应有无变化。结果:.、和组细胞/的表达量与对照组相比无差异.。不影响..对照组。而对/的表达俨..对都显著地抑制细胞/的和蛋白表达俨.和蛋白表照组,其中的抑制作用最强,分别降低/达%和%。.抑制/
8、表达后,逆转了对诱导的细胞胶原表达、胶原合成和细胞增殖的抑制作用俨...组。而对的效应无影响妒.组。结论:不影响/的受体表达量:能显著地抑制/的表达;对的效应具有/依赖性。因此,/激活介导了对的效应。关键词
