血管钠肽抑制低氧诱导的心肌成纤维细胞的增殖和胶原合成论文

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1、血管钠肽抑制低氧诱导的心肌成纤维细胞的增殖和胶原合成论文.freelLL-1）作用基础上的细胞增殖指数PI（S+G2/M）/（S+G2/M+G0/G1）（P0.01），10-6molL-1的VNP抑制低氧诱导的PI增加（P0.01）.低氧可以增加基础胶原合成（增加19.6%，P0.05）.freelLL-1）诱导的胶原合成速率（增加37.2%，P0.01）.10-8～10-6molL-1的VNP浓度依赖性抑制低氧诱导的胶原合成速率（P0.01）.结论低氧增加胶原合成以及血清刺激的CFs的增殖反应，VNP抑制上述作用，

2、从而抑制低氧引起的心肌纤维化.Keyyocardium/cytology;fibroblasts;celldivision;collagenAbstract:AIMToinvestigatetheinfluenceofvasonatrinpeptide（VNP）onhypoxia-inducedproliferationandcollagensynthesisinculturedcardiacfibroblasts（CFs）andthepre-ventivemechanismofVNPintheinterstitiu

3、mremodelingofischaemicheartdiseasesduetohypoxia.METHODSNeonatalratCFsaticdissociation.CellcyclekiicsofCFsetry.Collagensynthesisrateinedbymeasuring3H-pro-lineincorporationrate.RESULTSHypoxia（20～30mLL-1oxygen）alonefor24hdidn’tchangethecellcycleofcellsculturedonse

4、rum-freemedium，butsignificantlyin-creasedtheproliferationindex［（S+G2/M）/（S+G2/M+G0/G1）］ofCFs（25mLL-1）.VNP（10-6molL-1）inhibitedtheeffectsofhypoxiaonlo-inducedproliferation（P0.01）.Hypoxiaincreasedbasal（undernomoxide）andlo-inducedcollagensyntheses（un-dernomoxideLL

5、-1serum）by19.6%（P0.05）and37.2%（P0.01）inCFs，respectively.Inaconcen-trate-dependentmanner，VNP（10-8～10-6molL-1）de-creasedtheincorporationof3H-prolineinducedbyhypoxiafor24h（P0.01）.CONCLUSIONHypoxiamighten-hanceserum-inducedproliferationinCFsandincreasebasalandserum

6、-inducedcollagensyntheses.VNPmayattenuatemyocardialfibrosisinducedbyhypoxiabyinhibitingtheaboveeffects.0引言心肌梗死后纤维化是导致心脏功能异常的重要因素，纤维化的形成主要包括心肌成纤维细胞（CFs）的异常增殖和胶原沉积.作为心肌缺血后果的缺氧能够通过调节生长因子、酶、应激蛋白等的基因表达，调节心脏细胞的生长和分化［1］.占心脏非心肌细胞约90%的CFs，是心脏胶原纤维基质的细胞来源，而目前关于低氧对CFs直接影响的

7、报道很少.我们在培养的新生大鼠CFs上，观察了低氧对CFs生长周期和胶原合成速率的影响，以及心房肽家族新成员血管钠肽（VNP）对低氧所致的CFs生物学特性改变的影响，旨在从细胞水平探讨VNP对低氧引起心室结构重建的防治作用.1材料和方法1.1材料SD乳鼠（1～2d）由第四军医大学实验动物中心提供.胰蛋白酶、胶原酶、EDTA，DMEM干粉培养基和小牛血清购自Gibco公司;VNP购自中国科学院上海生物化学研究所;3H-proline购自中国科学院上海核技术开发公司;流式细胞仪为Coul-ter公司产品，型号为Elite

8、ESP;LS-6500液体闪烁计数器为美国Beckman公司产品.1.2方法1.2.1心肌成纤维细胞培养无菌条件下取出乳鼠心脏，剪碎，用1.25gL-1胰蛋白酶和0.75gL-1胶原酶进行梯度消化，差速贴壁1.5h后，吸弃未贴壁的心肌细胞，获得的成纤维细胞用含100mLL-1灭活胎牛血清的DMEM培养基培养至接近融合后传代，实验用第3～4代的成