细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4基因多态性与广州地区汉族人Graves病的相关性研究

《细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4基因多态性与广州地区汉族人Graves病的相关性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、lj】

2、胞褥性T淋也细胞相荚抗原4礁圈多态性与广州地区汉族人Graves病的柏关性研究细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4基因多态性与广州地区汉族人Graves病的相关性研究中山大学附属第一医院内分泌科磺士研究生：郝李敏导师：李惩兵剽教授中文摘要Graves瘸f∞)是一耱常觅的器害特异往稳身免疫往疾病，警自身受疫瞧擎状腺病之一。Graves病的发病机制和病因末明，与大多数自费免疫性疾瘸一样，易感性由遗传湖素和环境因索共同决定的。尽管已经进行了大量的研究，OD发瘸的遗传攀辊翻至今嵩泰阐臻。近年来不溺种族、不同娩区瓣矫究笈蕊，缁胞毒後T淋巴细胞相关抗原4(CTLA．4)基因与Graves病的发病

3、蠢关联，认为霹能是GD的易感基因。e甄A-4是一耱跨膜餐自，表这予滔亿静T细臌寝面，甜T缁魏静扩增起到抑制作用，保持免疫_陂答的平衡状念。在诱导1'细胞避行增赡进面分化成效应细胞时需要两种信号，第一信号来自抗原与其受体的结合，第二信号来自协同刺激分子帮抗原提星缀怼貘上鹃B7与T细胞表面酌eD28瀚结合。第一信号斌予免波应答的姆异性，此信号对T细胞活化是必需的，但不雩l起T细胞增生和分泌细腿因子；第二信譬无特辩性．但T细胞在抗原刺激下是否被激活，在一定程度上取决予第二信号，若有{办同刺激，T细胞竣激活，反之，下缅稳会成为无应昝往或发生死亡。丽CTLA．4分子也Ⅺ与协网刺激分子络会，毽却

4、发撵受性调节作耀，抑蠢《T细胞的扩增。如果CTLA．4基因的功能区发生改变，则会影响到CTLA一4分子的生理功能，不麓撺翻针对自隽抗豫靛免疫应答弓f起的病理损环，孤丽诱发自身兔疫性疫痰。由于遗传异质性的存在，相同的等位基因在不同的民族不同的地区可能所起的作蠲不同，本研究旨在探讨：@CTLA，4墓闲是否与广州地区汉族入GD发瘸有关。②进一步寻找零人群GD发病蛇翳感基因。为阐明GD豹遗传学发瘸极铡冀定细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4基刚多态性与广州地区汉族人Graves病的相共性研究～些基旗。槠瓣与方法1．研究对象(1)Graves瘸组：欺120例，收集于在找院门诊及病房就诊的无象缘关襞的G

5、D患者，均为广州地区汉族人。男35例，女85例，年龄36．6士12．8岁，发瘸年龄34。3圭12。3多，BMI19．87圭2．83Kg／m2，31镶青家族史，强馕有突黻，87例TRAb阳性。Graves病诊断依据：具蠢Graves病的典型临床表现，触诊和B超檎查证实甲状腺弥漫性肿大并和(或)突眼，sTSH降低，血FT3、FT4增离。Q)藏常对照维：获t23例，米基我陵公开招募的健康志愿者，均无GD家族史，无其它自身免疫性痰病的家族史，彼此之间无亲缘关系。其中男46铡，女77倒，体重摇数控麓在叠三常范围(18．5～24)，由于年龄对拜显率瀚影响，对照组入选年龄蹑比正嚣组大，为52。4士

6、13．6岁，BMI21，45士1．78Kg／m2，同时进行免疫指标的檎测和甲状腺功能的测定，TSH入选标准为O．4～4mU／l，热祭TSH的涌定值落在该范丽两铡时，砑绘予季辩豫；TRAb测定蓬均为酾往对力’可入级本礤究。2．实验方法及统计方法取外周静脉全血掇取人类基因组DNA，用PCR-RFLP技术分析CTLA-4基蠢舞显予1繁49谯点基因篷，计簿并我较基因整葙等往基鞠频率磋GD缀和正常对照组之间的分布差夥。CTLA一4外显子43’端AT羹复序列的基因型分析采用了目前世界公认的准确{生较高的微卫攫DNA检测方法一旗因扫描微卫星毽煮逡行薹因分垄，翔荧光蒙辩FAM标谗上游葶l犊，将荧光褥

7、记的待测PCR产物与ROX标记的DNA内在分子量标瞧同时进行变性处理藤，在377DNASequencefABIPRIS¨’M)仪上电泳3小时，墩后用GeneScan3．1软件进行圈像枝集和分辨，精确计冀出镞卫黧等位蒸函片断大小。统计处理采用SPSSll．0fbrWindows软馋，以双侧p<0．05为差异有统计学意义。计量资料以均数士标准差描述其特征，组间基因型频率、等位基因频珏缁巍毒性T游巴缨臌档关抗原4基瓣多卷性与广州地嚣汉族AGraves捕靛相关性研究率的比较采用，检验。实验结采与讨论对各缀鼹察到的基因型频率进行Hardy—Weinberg平衡检骏，检验说明所选人群蹩一个遗传平

8、衡静群体。1．计算正常对照缎与GD组CTLA．4基因A49G位点基因型频率、等能基因频率及∥检验，结果见褒l和表2：表1正常对照组与Orave$编组CTLA-4A49G基因型频率的比较分缓N(铡)AG∥POR篷(95％cb正常对照组12379(O．321)167(O．679)0．3650．5461．126(0．766。1+655)Graves痫缎12071(o．296)169(O．704>￡注】：OR篷：茯势魄。Ch鲎售灏阕。，梭验结果显示，在正常对照组与