泛素-蛋白酶体系在上皮性卵巢癌的差异性表达研究及阻断泛素-蛋白酶体途径促凋亡作用机制的初步分析

《泛素-蛋白酶体系在上皮性卵巢癌的差异性表达研究及阻断泛素-蛋白酶体途径促凋亡作用机制的初步分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、博士论文卵巢癌与泛素．蛋白酶体系统的关系英文缩略词英文缩写英文名称中文名称UPPUbiquitin-proteasomepathway泛素一蛋白酶体途径UbUbiquitin．泛素ElUbquitin-activatingenzyme泛素活化酶E2ubiql埘l嘲日llg硝flgenzyme泛素结合酶E3Ubiql埘nlpr℃lteiIIligase泛素一蛋白连接酶DM匣MDulbecx：o'smodifiedEagle'smedium删删培养基FCMFlowcytomeuyanalysis流式

2、细胞术PCRpolymerasechainreaction多聚酶链反应PBSPhophatebuffersolution磷酸盐缓冲液hnTThiazollBlue噻唑蓝RFDCkPCRrestrictionfragmentdifferentialdisplay限制性片段差异显示多聚酶polymerasechainreason链反应TI小lELDeadEndCo

3、orime确cSystem凋亡原位末端标记检测Cdkcyclindependentkinase周期素依赖性激酶RT-I’CRi'evas

4、eWanscriptasepolymerasechain逆转录酶多聚酶链反应reactionDUBdeubiquitinating∞lzyme去泛素化酶UBE4AubiquitinproteinfactorE4A泛素蛋白因子E4AUBPubiquitinspecificprotease泛素特异蛋白酶(蛋白名称)UPSubiquitin-proteasomesystem泛素一蛋白酶体系统USPubiquitinspecificprotease泛素特异蛋白酶(基因名称)DEPCDiethylcyan

5、ophosphonate氰代磷酸二乙酯DMSoDimethysulfoxide二甲基亚砜TEⅣ哐DN，N，N‘，N’-Tetramethylethylenediamine四甲基乙二胺ED呵AEthylenediaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸博士论文卵巢癌与泛紊．蛋白酶体系统的关系声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别中以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川大学或其他

6、教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文是本人在四川大学读书期间在导师指导下取得的，论文成果归四川大学所有，特此声明。申请人：于矽嚷指导教厩下受表下婷乏104博士论文卵巢癌与泛素．蛋白酶体的关系泛素一蛋白酶体系在上皮性卵巢癌的差异性表达研究及阻断泛素一蛋白酶体途径促凋亡作用机制的初步分析导师：羊惠君教授研究生：．杨瑛中文摘要目的：本课题通过采用限制片段差异显示聚合酶链反应(RestrictionFragmentD

7、ifferentialDisplay-PolymeraseChainedReaction,RFD沪PcR)技术建立卵巢癌组织与正常卵巢组织基因差异表达谱，初步分析比较与卵巢癌发病机制相关基因的表达差异，探讨卵巢癌与泛素一蛋白酶体系统的关系，有助于阐明卵巢癌的发病机制，寻找与临床诊断、治疗有关的生物学标记或治疗靶点；研究蛋白酶体抑制剂MGl32对人卵巢癌SKOV3细胞生长和凋亡的影响，旨在探讨其促凋亡作用机制。方法：采集上皮性卵巢癌手术患者的卵巢癌组织和正常卵巢组织，用RFDD-PCR技术平行操作

8、，建立卵巢癌组织与正常卵巢组织基因差异表达谱，对各组织问有表达差异的基因进行生物信息学分析，筛选与卵巢癌发病机制相关的基因，观察泛素．蛋白酶体系统重要组成部分基因表达差异，并用半定量RT-PCR方法和免疫组织化学法对差异表达行进一步验证；用MTT法测定MGl32对卵巢SKOV3细胞增殖的影响；流式细胞术检测各组细胞凋亡率和细胞周期的变化；采用TUNEL法观察细胞凋亡形态学变化；半定量RT-PCR技术、免疫细胞化学方法检测干预后细博士论文卵巢癌与泛素．蛋白酶体的关系胞中泛素一蛋白酶体相关基因、p5

9、3、bcl一2、caspase-3的mRNA和蛋白水平变化。结果：1．运用RFDD-PCR技术，我们构建了两种不同组织的基因表达谱，共获得了有意义的电泳条带5642条，其中卵巢癌组织2227条，正常卵巢组织3384条，其中癌组织和正常组织间有表达差异的片段为2082个，占表达数的36．9％．通过对卵巢癌组织差异表达谱的分析中发现与肿瘤的发生、发展密切相关的原癌基因和抑癌基因、细胞周期相关基因、增殖和凋亡相关基因、血管生长因子、代谢酶等6类基因36种因子的表达差异，其中在泛素一蛋白酶体系统中PSM