催乳素在子宫内膜异位症免疫学发病机制中作用的研究

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1、学位论文独创性声明本人所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确说明并表示谢意。学位论文作者签名：蝌日期：—翌丝盟学位论文使用授权声明本人完全了解安徽医科大学有关保留、使用学位论文的规定。学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版，有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅，有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索，有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学

2、位论文在解密后适用本规定。学位论文作者签名：日期：}安徽医科大学硕士学位论文英文缩写bpcDNACTLDEPCEBEMFCSIFN-7KI黜KARsHLALGLmAbsmRNANCRNKcellsPB英文缩略词表英文全称basepaircomplementaryDNAcytotoxicTlymphocytesdiethylpyrocarbonateethidiumbromideendometriosisfetalcalfserumgammainterferonkillerinhibitoryreceptorskilleractivatoryreceptorshumanleukocytea

3、ntigenslargegranularlymphocytenlonocIonalantibodiesmessengerRibonucleieAcidnaturalcytotoxicityreceptorsnaturalkiHercelisperipheralblood中文全称碱基对互补DNA细胞毒性T细胞焦碳酸二乙酯溴化乙锭子宫内膜异位症胎牛血清T干扰素杀伤抑制性受体杀伤活化性受体人类白细胞抗原大颗粒淋巴细胞单克隆抗体信使核糖核酸天然细胞毒性受体NK细胞外周血窒竺墨翌垄堂翌主兰堡垒查．——PBSPBMCPRLPRLRRT_PCRTNFTRFIATceIlsThphosphate-buf

4、feredsaline磷酸缓冲液peripheralbloodmononuclearcell外周血单个核细胞prolactin催乳素prolactinreceptor催乳素受体reversetransciptasepolymerase逆转录聚合酶链式反应tumornecrosisfactor肿瘤坏死因子time_nsolvedfluoroimmunoassay时间分辨的荧光免疫分析法TlymphocyticcellshelpTcell2T淋巴细胞辅助性T细胞安徽医科大学硕士学位论文催乳素在子宫内膜异位症免疫学发病机制中作用的研究摘要目的探讨子宫内膜异位症患者异位病灶的局部免疫状态；探讨子

5、宫内膜异位症患者全身和局部的催乳素水平；探讨催乳素对子宫内膜异位症患者免疫功能状态的调节作用。方法1．流式细胞术检测子宫内膜异位症患者异位病灶局部淋巴细胞的数量和表型选取因卵巢异位囊肿行剖腹手术的子宫内膜异位症(endometriosis，EM)患者共25例，对照组选同期25例因子宫肌瘤行全子宫切除术的妇女，增殖期12例，分泌期13例。刮取手术切除的EM患者异位内膜组织、在位内膜组织和子宫肌瘤患者(对照组)的在位内膜组织，分离单个核细胞，流式细胞术检测组织中淋巴细胞数量、表型的变化情况。2．免疫组化法检测EM患者异位病灶局部淋巴细胞的表达情况选取的病例同上共16例，刮取内膜组织，加入到1

6、0％的福尔马林溶液中，乙醇逐级脱水，常规石蜡包埋，留做病理组织学进行内膜组织的形态学鉴定，免疫组化检测子宫内膜组织中人淋巴细胞NK细胞(CD56)和T细胞(cD4、CD8)的表达情况。3．采用时间分辨的荧光免疫分析法检测EM患者全身外周血和局部异位病灶的催乳素水平收集16例EM患者的外周血、异位内膜和在位内膜组织，同时取因子宫肌瘤行安徽医科大学硕士学位论文全子宫切除术妇女的外周血和在位内膜组织。抗凝外周血2ml，离心取上清，内膜组织采用组织匀浆法充分研磨成匀浆后，离心取上清液，于。804C保存留作检测。采用PRL检测试剂盒和时间分辨的荧光免疫分析仪(TRFIA)检测分析。4．采用RT--

7、PCR方法检测EM患者异位病灶的催乳素受体mRNA表达水平收集16例EM患者异位内膜和在位内膜组织，同时取16例子宫肌瘤行全子宫切除术妇女的在位内膜组织作为对照。称取组织100rag，提取RNA，按AMV反转录试剂盒操作进行逆转录反应，获得CDNA，以口．actin、PRLR为引物进行PCR反应。5．重组人催乳素对EM患者外周血单个核细胞的调节作用无菌收集16例EM患者的抗凝外周血5ml，无菌分离外周血单个核细胞(PBMC)，24孔