胰岛素样生长因子1作用下的骨髓间充质干细胞对大鼠肺纤维化的治疗作用及其机制

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1、胰岛素样生长因子1作用下的骨髓间充质干细胞对大鼠肺纤维化的治疗作用及其机制TheeffectsandrelatedmechanismofIGF一1一treatedmesench．ymalstemcellsinpulmonaryfibrosisinrats作者姓名：包敏院系：医学院专业名称：内科学研究方向：呼吸内科指导老师：张德平教授郑重声明该论文是我本人在导师张德平教授以及指导小组其他老师的指导下进行的研究工作和取得的研究成果。论文中所有实验方法、数据及相关材料均属实。除了文中特别加以标注的内容外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的

2、研究成果。其他同志对该研究所做的贡献均已在论文中说明，并致以谢意。研究生签名：日期："9,0tt．of一汐南京大学学位论文使用授权声明南京大学有权保留本人所交的学位论文复印件和电子文档。以影印、缩印或其他方法保存论文。本人电子文档的内容与纸质论文内容一致，除在保密期内的保密论文外，允许论文被查阅和借阅，可公布论文的部分或全部内容。论文的公布或刊登授权由南京大学研究生院办理。研究生签名：导师签名：[日期：目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯3缩略词⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。5第一章间充质干细胞治疗肺纤维化的相关研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。6第二章胰岛素样生长因子1作用下的骨髓问充质干细胞对大鼠肺纤维化的治疗作用及其机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。16材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。26讨．i仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”34

4、结论⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”39致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．402008指导教师(姓名、职称)：蜷垩查咝中文摘要目的：通过观察胰岛素样生长因子I(IGF-1)作用过的骨髓间充质干细胞(BMSC)对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化模型的影响，探讨治疗肺纤维化的新方法。方法：体外分离、培养雄性6周龄SD大鼠的BMSC。将48只雄性成年SD大鼠(体重200～2409)随机分为4组，阴性对照组(N)，博莱霉素组(B)，间充质干细胞组(M)，IGF处理组(

5、I)。处理方法为：N组经支气管注入lml生理盐水，B、M、I组均经支气管注入lml博莱霉素(5mg&g)。在造模2d后，B组大鼠经尾静脉注入生理盐水0．5ml，M组大鼠经尾静脉注入CM．Dil标记的骨髓间充质干细胞0．5ml(细胞数为2X106)，I组注入相同数量的标记BMSC(经过IGF．1培育48h)。在造模的第7d、14d、28d批量处死各组大鼠，留取肺组织进行HE染色、Masson染色评价肺组织病理变化，冰冻切片观察肺组织内细胞定植情况、消化法测定肺组织羟脯氨酸(HYP)含量，RT．PCR方法检测各组大鼠肺组织肝细胞生长因子

6、(HGF)mRNA的表达水平。结果：M、I组在显微镜下可见红色荧光标记的BMSC，I组不同时间点的IOD值均高于M组，且M、I组的荧光在28d时都有所衰减。M、I组的炎症在实验早期便轻于B组，其中M组更明显，至28天时M、I组炎症评分与N组无统计学差异。B、M、I组肺纤维化评分在博莱霉素注入14d时都明显高于N组(分别P<0．01，P<0．05，薹P<0．05)，28d时M，I组的肺纤维化程度轻于B组(分另lJP<0．05，P<0．01)，但M、I两组之间始终不存在统计学差异。B组的羟脯氨酸含量在整个实验阶段均高于其他三个组(P均<

7、O．01)，而I组的值始终与N组无差异(P均>0．05)，M组的值在早期大于I、N组，至28d降至与对照组间没有统计学差异。N组、B组的HGFmRNA表达一直保持在较低水平，M、I组HGFmRNA的表达水平在第7d时没有差异，均高于N、B组(P均<0．01)，至第14d时I组的值开始高于M组(P<0．05)，28d时这种差异更加明显(P

8、子英文摘要THESIS：TheeffectsandrelatedmechanismofIGF-1一treatedmesenchymalstemcellsinpulmonaryfibrosisinratsSPECIALIZATION：R