降解cspgs对骨髓间充质干细胞治疗大鼠视网膜变性的作用

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1、第二军医大学硕士学位论文降解CSPGs对骨髓间充质干细胞治疗大鼠视网膜变性的作用ChondroitinSulfateProteoglycansDegradationImproveBoneMesenchymalStemCellsTherapyinRetinalDegenerationRats姓名：郑祥榕导师：柳林教授学科、专业：眼科学申请学位级别：硕士培养单位：第二军医大学长海医院眼科独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写

2、过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。⋯一虢气鼋蠡吼肌锄蛔学位论文版权使用授权声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定，第二军医大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文全文或部分内容编入《中国学位论文全文数据库》、《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》等数据库进行检索。可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本

3、授权书)导师签名：日期：乃f≥年岁月．；o日璐移1奄、咽名月签皇者年作3文引蜮如僦姚学日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6日IJ舌”⋯一””⋯⋯一”⋯⋯“一⋯⋯“⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”一一“⋯⋯⋯⋯‘6参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10第一部分弟一鄙分视网膜变性大鼠模型建立及骨髓间充质干细胞

4、的培养鉴定一、材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13二、结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16三、讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24第二部分降解CSPGs对BMSCs治疗视网膜变性大鼠的作用研究一、材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27二、结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30三、讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33参考文献⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37附蜀芑⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯··⋯··⋯⋯⋯·⋯⋯⋯一··一⋯⋯一⋯⋯·39综述⋯⋯⋯··⋯·······⋯⋯·⋯⋯··⋯··⋯··⋯⋯⋯·⋯··········⋯·⋯⋯··40在读期间发表论文情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯50降解CSPGs对骨髓间充质干细胞治疗大鼠视网膜变性的作用摘要视网膜变性是一类难治性疾病，其中最常见的有年龄相关性黄斑变性(agerelatedmaculardegenera

6、tion，AMD)，视网膜色素变性(retinitispigmentosa，RP)等，全世界有数百万人因此永久致盲，危害性极大。因视网膜属于终末神经组织，神经细胞再生困难，此类疾病的治疗非常棘手。骨髓间充质干细胞(Bonemesenchymalstemcells，BMSCs)是一种具有多向分化潜能的成体干细胞，可分化为视网膜神经元细胞或胶质细胞，可抑制神经细胞的凋亡，可分泌多种具有营养功能的细胞因子。但是BMSCs在视网膜下腔移植后，大部分细胞主要集中在注射区域，难以迁移、整合入视网膜，从而限制了BMSCs在病变视网膜

7、上发挥其修复作用。有研究证实，胶质细胞和硫酸软骨素蛋白多糖(chondroitinsulfateproteoglycans，CSPGs)是Miiller细胞移植入RCS大鼠视网膜的障碍，用硫酸软骨素酶(chondroitinaseABC，ChABC)降解CSPGs后可促使Mialler细胞在视网膜上大量移行。那么，BMSCs在变性视网膜内迁移困难的原因可能也和视网膜上CSPGs形成的屏障有关。本实验拟将ChABC处理的BMSCs移植到视网膜变性大鼠视网膜下腔，观察ChABC降解CSPGs后BMSCs在视网膜上的迁移情况

8、，以及对视网膜细胞凋亡的影响，从而寻找提高BMSCs移植治疗视网膜变性疗效的途径。研究目的：建立碘酸钠诱导视网膜色素变性大鼠的动物模型。建立体外分离、培养、鉴定、标记大鼠骨髓间充质干细胞的方法。视网膜下腔注射硫酸软骨素酶处理的BMSCs，探讨降解CSPGs对于BMSCs治疗视网膜色素变性的作用。研究方法：1、4周龄的SD大鼠40只