《实验四糖发酵实验》PPT课件

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1、实验四糖发酵实验一、目的要求1.了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用。2.掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。二、基本原理糖发酵试验是最常用的生化反应,在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源,但是它们在分解糖的能力上有很大的差异,有些细菌能分解某种糖并产酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和气体(如氢、甲烷、二氧化碳等);有些细菌只产酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气;伤寒杆菌能分解葡萄糖产酸不产气,不能分解乳糖;普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气,不能分解乳糖。二、基本原理酸的产生可利用指示剂来

2、断定。在配制培养基时预先加入溴甲酚紫[Ph5.2(黄色)-6.8(紫色)],当发酵产酸时,可使培养基由紫色变为黄色。气体的产生可由发酵管中倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明。三、实验材料1.大肠杆菌,普通变形杆菌(Proteusvulgaris)斜面各1支;2.盛有葡萄糖发酵培养基的试管和乳糖发酵培养基的试管各3支(内装有倒置的德汉氏小管),试管架,接种环等。图1糖类发酵试验四、操作步骤1、编号用记号笔在各试管上分别标明发酵培养基名称和所接种的菌名。2、接种取盛有葡萄糖发酵培养基的试管3支,按编号1支接种大肠杆菌,另1支接种普通变形杆菌

3、,第3支不接种,作为对照。另取乳糖发酵培养基试管3支,同样1支接种大肠杆菌,1支接种普通变形杆菌,第3支不接种,作为对照。3.将上述已接种的葡萄糖和乳糖发酵试管和对照管置37℃温室中培养24小时。注意事项:接种后应轻轻摇动试管,使其均匀,防止倒置的小管进入气泡。否则会造成假象,得出错误答案。观察结果:观察结果时,看各管颜色变化及杜氏小管有无气泡。产酸产气用“⊕”表示;只产酸不产气用“+”表示;不产酸也不产气用“—”表示。假如某种微生物可以有氧代谢葡萄糖,发酵试验应该出现什么结果?思考题:

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