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时间:2018-05-24
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1、Themeasurementofthebloodsugarandeffectsofadrenalinonbloodsugarconcentration血糖测定及肾上腺素对血糖浓度的影响Exp.6ResearchCenterforBiochemistryandMolecularBiologyPurpose1、Studytheprincipleandthemethodsofthemeasurementofbloodsugar(了解血糖测定的原理和方法)2、Masterthetheoryofinfluenceofad
2、renalinonbloodsugarconcentration(掌握肾上腺素对血糖浓度的影响机制)Principle1.血糖的来源与去路2.AD对血糖浓度的影响AD+受体AC酶(-)AC酶(+)ATPcAMPPKA(C2R2-)PKA(2C+)糖原合酶a(+)糖原合酶b-P(-)抑制糖原合成磷酸化酶b(-)磷酸化酶a-P(+)促进糖原分解磷酸化酶b激酶(-)磷酸化酶b激酶-P(+)3、reaction(无蛋白血滤液与碱性铜试剂反应)(1)Cu2++COONaCHOHCHOHCOOKCOONaCHOCHOCOO
3、KCu+2H2OOH-(2)、COONaCHOCHOCOOKCu+2H2O+CHO(CHOH)4CH2OHCOOH(CHOH)4CH2OH+Cu2Ored3Cu2O+H3PO4•12MoO3H3PO4•6MoO3•3Mo2O3+6CuOblue420nmH2SO4Na2WO4+H2WO4+Na2SO4H2WO4+PrNH3+COOHPrNH3+COOH()2WO4(棕色凝块)Preparationofthebloodfiltraterwithoutprotein(制备无蛋白血滤液)Operation1、prep
4、arationofthebloodfiltraterwithoutprotein①取干燥锥形瓶2只,每只加7ml蒸馏水,用奥氏吸管吸取草酸抗凝血(正常血和加AD血)各1ml;②1mlH2SO4,逐滴加入,边加边摇;1mlNa2WO4,逐滴加入,边加边摇;?③静置10min,血溶液由红色变为棕色凝块,用干燥的滤纸过滤,收集滤液待用;?2、Themeasurementofbloodsugar???Mixup,remainfor2min(releaseCO2)Reagent(ml)G标准液无蛋白血滤液H2O碱性铜试剂
5、磷钼酸试剂加H2O至S(标准)2.00--------2.002.0025.0U1(正常)U2(AD)--------2.002.00--------2.002.002.002.0025.025.00(空白)--------2.002.002.0025.0Mixup,100℃for8min,noshaking,coldwaterfor3min,noshaking充分摇匀(上下颠倒),待气体消失后,420nm处比色(取4只血糖管进行操作)Attentions1、奥氏吸管吸血溶液;2、加H2SO4和Na3WO4时一
6、定要滴加,边加边摇;3、滤纸勿打湿;4、沸水浴和冷水浴时勿摇动;5、血糖管测定血糖浓度;6、准确定容至25.0ml,颠倒混匀;7、420nm波长比色;Resultsmg%=100×ODuODsNO.OU1U2SOD420G(mg%)Discussion1、为什么测定血糖时必须预先除去蛋白质?2、为什么选用奥氏吸管吸取血液?3、为什么用Folin-Wu血糖管测血糖浓度?4、为什么测定血糖时必须空腹采血?实验十一甘油三酯测定P33Previewthenextexperiment
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