纳米金放大SPR双通道同时检测前列腺癌肿瘤标志物fPSA和tPSA

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1、中图分类号UDC0657．1540学校代码密级硕士学位论文10533纳米金放大SPR双通道同时检测前列腺癌肿瘤标志物f-PSA禾llt．PSASimultaneousDetectionofFreeandTotalProstateSpecificAntigenUsingDualChannelSurfacePlasmon1’、BasedGoldNamparticlesSignaKesonanceBasedonGoldNanooarticlesSignal。Amplification作者姓名：学科专业：研究方向：学

2、院(系、所)：指导教师：彭贞化学分析化学化学化工学院向娟教授中南大学2013年5月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：塑楚日期：冱丛年』月4日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并

3、根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名扯导师签名鱼避日期：掣年上月挈日纳米金放大SPR双通道同时检测前列腺癌肿瘤标志物fPSA和t．PSA摘要：前列腺癌已成为继肺癌的第二大男性健康杀手，前列腺特异性抗原(prostatespecificantigen，PSA)目前被认为是前列腺癌最有效

4、的生物标志物并广泛应用于前列腺癌的临床诊断。单独检测血清中的PSA含量来诊断前列腺癌容易造成误诊，尤其是在灰区(PSA浓度在4～10ng．mL。1)前列腺癌与前列腺增生之间易误诊，而游离前列腺特异性抗原(f-PSA)与总的前列腺特异性抗原(t．PSA)之比(f／t)被认为是目前区分灰区前列腺癌与前列腺增生最有效的方法。表面等离子体激元共振技术具有快速灵敏、检测限低、免标记、耗样量少、实时监测等特点；已广泛应用于药物的筛选、食品的分析检测、环境监测和重大疾病的临床诊断等领域。纳米金具有良好的生物亲和性，在检测中

5、常被用来放大信号，将纳米金应用到SPR技术中能克服传统的SPR技术很难直接检测低浓度、小分子量的物质的缺点。本文在研究中利用表面等离子体子共振技术灵敏度高、检测限低的优点，纳米金放大信号，抗原抗体间的特异性结合，建立了一种SPR双通道同时检测f-PSA和t-PSA的检测方法。磁性纳米粒子具有优良的磁导向性、生物降解功能、生物亲和性和活性能力基团等性质，广泛用于生物医学领域。本文用化学法制备了直径约为30nln大小的Fe，04@Au磁性纳米材料，用紫外．可见吸光光度法、TEM对其进行表征，粒径分布均匀，分散性较

6、好。本论文的主要工作包括：一、合成分散性较好直径约为20nlyl的纳米金，用PSAantigen包裹纳米金制备了金标抗原探针，在检测过程中用来放大SPR信号。二、探究了直接检测法、免疫夹心法和抑制竞争法检测f-PSA和t-PSA。因t-PSA在血清中的浓度较大，而且其分子量也较大，故可以对其直接检测。f-PSA在0．05～-0．4ng．mL。范围内呈现线性范围，t-PSA在1～20ng．mLJ之间呈线性范围。最后检测实际样品，得出正常人血清中价值为28．95％，前列腺增生患者的平均∥t值为22．40％，前列腺

7、癌患者的平均趴值为16．60％。所得的区分前列腺癌与前列腺增生的仇值与文献报道的接近，为前列腺癌的临床诊断，灰区前列腺癌和前列腺增生的区分提供了新的检测方法。三、通过共沉淀法制备了粒径较小的Fe，04纳米粒子，并用四甲基氢氧化铵做稳定剂。以Fe，04纳米粒子为核，再利用柠檬酸钠作还原剂还原HAuCl4，得到的Au包裹在Fe304外面制备Fe304@Au磁性纳米粒子。通过紫外一可见吸光光谱和TEM对其进行表征，并对实验条件进行了摸索，最终制得粒径分布均匀、分散性好的Fe，04@Au磁性纳米粒子。本文含图37幅，

8、表5个，参考文献共122篇。关键词：表面等离子体激元共振；前腺特异性抗原；竞争型免疫分析法；纳米金；磁性纳米粒子分类号：0657．3SimultaneousDetectionofFreeandTotalProstateSpecificAntigenUsingDualChannelSurfacePlasmonResonanceBasedonGoldNanoparticlesSignalAmplific