基于纳米容器的肿瘤标志物检测方法研究

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1、ｔ－：学校代码分类号：１０４２６＇１４密级：４０３０５００２学号；著应种化乂營ｑＵ订ＱｉｎｇｄａｏＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ专业硕±学位论文ＰＲＯＦＥＳＳＩＯＮＡＬＭＡＳＴＥＲＤＥＧＲＥＥＴＨＥＳＩＳ基于纳米容器的肿瘤标志物检测方法研究作者：ＭＭ指导教师：王卫教授学科专业：化学工程专业代码：０８５２１６研究方向：生物电化学分析２０１５年６月７日基于纳米容器的肿瘤标志物检测方法研究学位论文完成日期：２０１５年６月

2、７日指导教师签字．；—化＿＿＿答辩委员会成员签字：狐化（／＿少＾基于纳米容器的肿瘤标志物检测方法研究摘要第一部分在癌细胞的生长繁殖过程中，细胞内的ＡＴＰ的含量会发生明显变化，另外，细胞死亡过程中，ＡＴＰ的合成受到抑制，细胞中ＡＴＰ的含量迅速降低。研究细胞内ＡＴＰ的含量，对于了解癌细胞病变程度和细胞的新陈代谢状态具有重要意义。本实验用还原Ｈ氣乙酸银法制备了银纳米立方体，并通过银纳米立方体合成了中空、壁薄的金纳米容器并用透射电子显微镜（ＴＥＭ）、紫外分光光度计ＵＶ－（）对其进行了初步表征。根

3、据ＴＥＭ照片显示金纳米容器粒径在３０４０ｎｍ；利用ＤＮＡ杂交技术将金纳米容器和金纳米粒子组装成ＤＮＡ生物传感器，然后通过检测ＡＴＰ置换下来的引物链的量检测ＡＴＰ浓度，并利用核酸外切酶循环放大技术实现了信号放大。在实验的最隹条件下，对不同浓度的ＡＴＰ进行测定，－９－７－？ｉ〇得到ＡＴＰ的检测线性范围：ｌ．ＯｘｌＯｌ．〇ｘｌ〇ｍｏｌ／Ｌ，检测限：８．８ｘｌ〇ｍｏｌ／Ｌｘ－６（３〇）。实验还对Ｈｅｌａ细胞提取液中的ＡＴＰ进行测定３．２７ｌ〇ｍｏｌ／Ｌ。，结果为第二部分采用合成的新型电化学探针检测蔬基化合物。通过优化实验确定检

4、测ＧＳＨ０－的最佳检测条件为．２ｍｏｌ／ＬＢＲ缓冲溶液（Ｈ２．０）中反应２０ｍｉｎ。在此条，ｐ－－－ｉｘ９ｘｉＧ件下，检测线性范围为ｌ．〇ｘｌ〇Ｍ．〇ｌ〇ｍｏｌ／Ｌ，检测限达ｌ．〇ｌ〇ｍｏｌ／Ｌ（３口，＝ｎｌｌ）。另外，通过差示脉冲伏安法（ＤＰＶ）我们检测了探针对金属硫因蛋白（ＭＴ）及谷腕甘肤还原酶（ＧＲ）的电化学响应。比较了探针对蛋白琉基（ＭＴ）和非蛋白琉基－（ＧＳＨ）电化学检测的灵敏度，ＤＰＶ分析结果表明，ＴＴＦＢＢＳＤＳＨ针对蛋白蔬基的响应更灵敏。对ＭＴ的响应明显高于Ｇ，即探关键词：金纳米容器；ＡＴＰ；巧光检

5、测；电化学：谷腕甘肢ＩＡＢＳＴＲＡＣＴＳＴＵＤＹＯＦＴＵＭＯＲＭＡＲＫＥＲＳＤＥＴＥＣＴＩＯＮＢＡＳＥＤＯＮＧＯＬＤＮＡＮＯＣＯＮＴＡＩＮＥＲＡＢＳＴＲＡＣＴＰａｒｔｉＩｎｔｈｅｒｏｃｅ化ｏｆ化ｅｒｏｗｔｈａｎｄｂｒｅｅｄｏｆｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓｔｈｅｃｏｎｔｅ打ｔｏｆＡＴＰｉｎｉｎｇ，ｐｇ化ｅｃｅｌｌｗｉｌｌｃｈａｎ呂ｅｏｂｖｉｏｕｓｌｙ，ｏ打化ｅｏ化ｅｒｈａｎｄ：ｉｎ化ｅｄｅａｔｈｐｒｏｃｅｓｓｏｆｃｅｌｌ：化ｅＡＴＰ山＊ｓｙｎｔｈｅｓｉ

6、ｓｏｆｉｓｒｅｓ化ａｉｎｅｄｔｈｅＣＯ打ｔｅ打ｔｏｆＡＴＰｉｎ化ｅｃｅｌｌｗｉｌｌｃｋｌｙｒｅｄｕｃｅ．：ｑＳｔｕｄｙｔｈｅＣＯ打ｔｅ打ｔｏｆＡＴＰｉｎｔｈｅｃｅｌｌｉｓｏｆｒｅａｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｆｏｒｏｕｒｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇｏｆｇ也ｅｍｅｔａｂｏｌｉｃｓｔａｔｅａｎｄｌｅｓｉｏｎｓｅｖｅｒｉｔｙｏｆｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓ．Ｉｎｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ｗｅｐｒｅｐａｒｅｄ化ｅｓｉｌｖｅｒｎａｎｏｃｕｂｅｗｉｔｈｔｈｅｍｅｔｈｏｄ

7、ｏｆｒｅｄｕｃｔｉｏｎｔｒｉｆｌｕｏｒｏａｃｅｔｉｃａｃｉｄａｎｄｈｏｌｌｏｗｔｈｉｎｗａｌｌｏｌｄｎａｎｏｃｏｎｔａｉｎｅｒｗａｓ，ｇｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄｂｙｓｉｌｖｅｒ打ａｎｏｃｕｂｅ．Ｔｈｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙｏｆｇｏｌｄ打ａｎｏｃｏｎｔａｉｎｅｒｗａｓｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄｂｙｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅＴＥＭａｎｄ（）ｕｌｔｒａｖｉｏｋｔｓｅｃｔｒｏｈｏｔｏｍｅｔｅｒ．Ａｃｃｏｒｄｉｎ１：ｏｔｈｅＴＥＭｔｈ

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