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1、体内药物分析测定前生物样品的预处理及定量分析方法一、体内药物分析的定义体内药物分析是指通过采用不同的分析技术,对体内不同体液和组织的药物进行分离和分析,从分子、细胞水平来探索药物的体内动力学过程、药效学和毒理学机制。二、体内药物分析的特点干扰杂质多样品量少，不易重新获得药物浓度较低，对方法灵敏度和专属性要求高检测分析方法，要求简便、快速、准确实验室应拥有多种仪器设备工作量大，测定数据的处理和阐明有时不太容易三、体内药物分析测定前生物样品的预处理样品种类常用的样品的种类包括血样,唾液和尿液血样是指全血、血浆或血清,一般情况下血浆分离快、易得,故最常用唾液是由腮腺、颌下腺、舌下腺及口腔黏膜内
2、腺体分泌的尿药浓度测定主要用于剂量回收、药物代谢和生物利用度等研究脏器组织，除非特别需要，在临床治疗药物监测中很少使用体内药物分析测定前样品的处理方法蛋白质的去除包括加入与水混溶的有机溶剂、加入沉淀剂、酶解法等。有机破坏当测定生物样品中的金属离子时,多采用有机破坏的方法分离、纯化与浓集当药物浓度较低或分析方法的特异性或灵敏度不够高时,生物样品需进行分离、纯化与浓集处理，萃取法是应用最多的分离、纯化方法。四、体内药物分析测定的基本程序采样样本贮存样本制备待测物的分离和鉴别最后的定量分析样品的采集目前的采集样品多为血液和尿液所用方法有室灌流法、灌流引流法、皮层造室灌流法等,但是这些方法有一个
3、共同的缺点,就是对组织和器官有明显的损伤,并需在麻醉的状态下试验。近年来,出现微透析法采集样品,微透析可应用于任何组织和器官,对组织无明显的伤害,可以研究在非麻醉状态下动物体内各种微环境的变化。样品的贮藏血样、唾液取样后如不能立测定时,短期保存时可置冰箱(4℃)、长期保存时需在-20℃或-80℃冷藏。全血未经分离时,不宜直接冷藏保存。尿液若需收集2预处理4小时或更长时间的样品或不能立即测定的,应加入防腐剂后置冰箱中冷藏保存。样品的制备,即样品的预处理样品通常在最后测定前要采取适当的样品制备,即进行分离、纯化、浓集三步,必要时尚需对待测组分进行化学改性,为测定创造良好条件。样品的预处理是体
4、内药物分析中最复杂最繁琐也是最重要的一步,目的主要是排除干扰,提高分析灵敏度定量分析荧光分析法利用物质发射荧光的特性进行分析的光学分析法。其优点是灵敏度高、选择性好等。高效液相色谱法(HPLC)它是以经典液相色谱为基础,以微粒型填料作固定相,采用高压送液泵和各种高灵敏度检测器。具有分离效能高、分析速度快、检测灵敏度高等特点。免疫分析法免疫分析法特别适用于色谱法难以分析的药物五、展望近年来体内药物分析发展迅速,各种新方法、新技术的联合使用使得从样品的采集、处理、分离到检测完全自动化成为了现实,Lc-MS/MS、Lc-NMR、LC-NMR/MS等的联合正深刻改变并推动着体内药物分析的发展,采
5、集样品的无损化、微量化、获得信息的高通量化在线化,试剂消耗的低量化,已成为今后体内药物分析发展的新方向,体内药物分析将受到越来越多的关注与重视。谢谢
