传染性法氏囊病毒VP2蛋白的表达及间接

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1、安徽农业大学学报,2011,38(4):633-636JournalofAnhuiAgriculturalUniversity[DOI]CNKI：34-1162/S.20110624.1624.016网络出版时间：2011-06-2416:24:26[URL]http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1162.S.20110624.1624.016.html传染性法氏囊病毒VP2蛋白的表达及间接ELISA抗体检测方法的建立*宋军，黄成斌，单雪芹，潘玲(安徽农业大学动物科技学院，合肥23

2、0036)摘要：建立以传染性法氏囊病毒（IBDV）VP2蛋白为诊断抗原的传染性法氏囊病（IBD）血清学检测方法，研究了VP2蛋白的编码基因，并在原核表达系统中表达了VP2蛋白。用表达的VP2蛋白建立了IBDV间接ELISA检测方法。抗原最佳包被量为每孔174.67ng，血清最佳稀释度为1:40。对采自安徽部分地区的979鸡血清样品进行检测，IBDV抗体阳性率为39.73%。结果证实，间接ELISA法用于IBD血清抗体的监测具有良好的特异性，是一种快速简便的血清学方法，值得在基层推广应用。关键词：传染性法氏囊病病毒

3、；VP2蛋白；间接ELISA；抗体检测中图分类号：S852.657文献标识码：A文章编号：1672−352X(2011)04−0633−04EstablishmentofanindirectELISAmethodusingainfectiousbursaldiseasevirusVP2proteinasantigenSONGJun,HUANGCheng-bin,SHANXue-qin,PANLing(SchoolofAnimalScienceandTechnology,AnhuiAgriculturalUnive

4、rsity,Hefei230036)Abstract:TheVP2proteinofinfectiousbursaldiseasevirus(IBDV)ishighlyconservedandcouldbeusedasdiagnosticantigeninserologicaltest.Inthisstudy,aVP2proteingenewasclonedandexpressedinEscherichiacoli.TheexpressedproteinwasusedtoestablishanindirectEL

5、ISAmethod.Theoptimalcoatingconcentrationofantigenwasamountedto174.67ngofVP2proteinperwell，andtheserumsamplefortestingwasdilutedto1:40.Atotalof979serumsamplesoriginatedfromdifferentareasinAnhuiprovinceweredetectedbythisindirectELISA,andthepositiveratewas39.73%

6、.TheresultsconfirmedthatindirectELISAwasspecifictomonitorse-rumantibodyofIBD.Thisdetectionmethodisquickandeasy,anditisdeservedtobepopularized.Keywords:infectiousbursaldiseasevirus；VP2protein；indirectELISA；antibodymonitoring[4]传染性法氏囊病（IBD）是由IBDV引起雏鸡的感染。本试验建立了检

7、测IBDVVP2抗体的间[1]的免疫抑制性疾病。由于该病破坏了机体的免疫接ELISA方法,对2008-09~2009-08期间在临床收[2]组织，使机体的抵抗力下降，容易引起其他病原集的979份鸡血清进行了检测，并对抗体检测数据的感染，加大死亡率或增加用于控制继发感染的药进行了生物统计学分析，旨在探索IBD抗体形成规费，而增加养殖成本。律，为该病防控提供临床一手资料。[3]IBDV对外界环境的抵抗力很强，要将其从环1材料与方法境中彻底清除比较困难。用常规IBD疫苗免疫鸡群屡有发病现象，给养鸡业带来了很大的损失。因

8、此1.1试剂对IBD免疫抗体水平产生规律的研究和免疫抗体检对安徽省部分养鸡地区送检病鸡进行随机采测显得十分重要。IBDVVP2具有血清型特异性，血，常规方法分离血清，置－20℃冰箱保存。详细其诱导的中和抗体能被动地保护宿主抵御IBDV记录收集样品基本情况。收稿日期:2010-12-30作者简介:宋军，男，硕士研究生。E-mail：songjun06113070@163.c