粒细胞集落刺激因子GCSF对脓毒症小鼠免疫功能的影响

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3、察粒细胞集落刺激因子(G．CSF)治疗后脓毒症小鼠中性粒细胞表面抗原CD64表达率、血清TNF．0【、IL．10浓度及小鼠1周生存率的变化，探索G．CSF对脓毒症小鼠免疫功能的影响，为G．CSF治疗脓毒症的研究提供理论基础。方法：1、实验动物：10．12周龄(体重18．25克)健康的雄性昆明小鼠140只。2、动物模型：采用腹腔内注射LPS的方法建立脓毒症小鼠模型。3、实验分组及处理：将小鼠随机分为四组，每组共35只：A组(健康对照组)腹腔内一次性注射与B组同等剂量的生理盐水；B组(脓毒症模型组)腹腔内一次性注射lOmg／kg剂量的LPS：C组(空白治

4、疗组)于腹腔注射LPS后6h、30h皮下注射与D组同等剂量的生理盐水；D组(G—CSF治疗组)于腹腔注射LPS后6h、30h皮下注射50ug／kg)*tJ量的重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)。每组随机抽取10只，观察各组小鼠的一般情况及l周生存率，并绘制生存率曲线：每组的其余25只，于建模后12h、24h、36h、48h、60h时间点各取5只小鼠，采集外周血用于检测。4、实验方法：采用流式细胞技术(FCM)检测小鼠外周血中性粒细胞表面抗原CD64的表达率(％)；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清TNF．a及IL．10的浓度(pg

5、／m1)。5、统计学方法：采用Excel2003和SPSSl8．0统计软件处理实验数据，进行统计分析。结果：1、小鼠注射LPS后均出现了明显的中毒症状，G．CSF治疗组小鼠较脓毒症模型组及空白治疗组小鼠症状恢复更快。脓毒症模型组及空白治疗组小鼠1周生存率均为50％，G．CSF治疗组小鼠1周生存率为60％，G．CSF治疗组小鼠生存率较脓毒症模型组及空白治疗组略有增加，差异无统计学意义(尸>0．05)。2、健康对照组小鼠各时间点中性粒细胞表面抗原CD64仅少量表达。脓毒症组小鼠在LPS注射后12h中性粒细胞表面抗原CD64表达率即达到峰值(45．51+3

6、．32)％，相比于健康对照组(2．69+1．00％)显著升高(P

7、的峰值，48h才出现明显的下降，60h仍显著高于健康对照组(P

8、5pg／ml、126．09+9．77pg／ml，较脓毒症模型组及空白治疗组显著升高(尸<0．05)，12h、