牛大力对小鼠免疫功能的影响

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1、牛大力对小鼠免疫功能的影响韦翠萍，刘丹丹，唐立海，刘亮锋，赖平，王艳，叶木荣【摘要】【目的】观察牛大力水提液对小鼠免疫功能的影响。【方法】选用SPF级KM小鼠，通过计算小鼠脾脏指数、胸腺指数、廓清指数和采用血清溶血素试验法、二硝基氯苯诱导小鼠迟发型变态反应试验法，观察高、中、低剂量牛大力(剂量分别为20、10、5g·kg-1·d-1)对正常小鼠免疫调节的影响。通过测定免疫抑制小鼠(灌胃给予40mg·kg-1·d-1醋酸泼尼松)脾脏指数、胸腺指数以及廓清指数，观察高、中、低剂量牛大力(剂量同前)对免疫低下小鼠免疫调节的影响。【结果】牛大力对正常小

2、鼠脾脏指数、胸腺指数以及廓清指数均无显著性影响，但能不同程度地增加免疫低下小鼠的脾脏指数、胸腺指数及廓清指数(P005或P001)。牛大力能显著提高小鼠血清溶血素含量(P005)，不同程度抑制小鼠迟发型皮肤过敏反应，但差异无显著性意义(与模型组比较，P>005)。【结论】牛大力能不同程度地提高正常小鼠和免疫功能低下小鼠的免疫功能。【关键词】牛大力/药理学;免疫功能低下/中药疗法;溶血素/血液;疾病模型，动物;小鼠牛大力(RadixMillettiaeSpeciosae)，载于《陆川本草》，为蝶形花科植物美丽崖豆藤Milletias

3、peciosaChamp的干燥根。功能清肺止咳，清凉解毒，用于治疗咳血，痢疾，温病身热口渴，头昏等。本实验观察了不同剂量牛大力水提液对小鼠免疫功能的影响，现报道如下。　　1材料与方法　　11动物SPF级KM小鼠,体质量18～22g，雌雄各半;SPF级豚鼠，体质量250～300g，均由广州中医药大学实验动物中心提供。合格证号：SCXK粤20030001。　　12药物与制备醋酸泼尼松片由广东华南药业有限公司生产(批号：071104)。牛大力购于广州致信中药饮片有限公司(批号：070701),制备方法：取牛大力干燥药材，用10倍体积的蒸馏水浸泡

4、1h，加热煮沸2h，趁热过滤，残渣再加6倍体积的蒸馏水，加热煮沸1h，合并2次滤液，浓缩至1g/mL浓度备用，用时加蒸馏水稀释至所需浓度。　　13试剂与仪器二硝基氯苯(DNCB)由上海试剂一厂生产(批号：20000101)，丙酮由天津市红岩化学试剂厂生产(批号：2006730)。UNICO7200型光栅分光光度计由尤尼柯上海仪器有限公司提供，LDZ5型离心机由北京医用离心机厂生产，AnkeTGL16G型高速离心机由上海安亭科学仪器厂生产，小鼠60只，随机分为5组：空白组，醋酸泼尼松组(剂量为40mg·kg-1·d-1)，牛大力高、中、低剂量

5、组(剂量分别为20、10、5g·kg-1·d-1)。每天灌胃给药1次，连续给药12d。末次给药1h后，将小鼠脱颈椎处死，称体质量，取脾脏和胸腺，用电子天平称质量，计算脾脏和胸腺指数(脾/mbody，胸腺/mbody。　　15牛大力对正常小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响[1-3]分组及给药方法同14。于末次给药1h后，各鼠尾静脉注射50g/L中华墨汁生理盐水液10mL/kg，于注射墨汁后2min及12min，用毛细玻璃管从小鼠眼眶后静脉丛取血2～3滴，吸20μL溶于1g/LNa2CO33mL溶液中，摇匀，于分光光度计680nm处测吸光度(D)值

6、，计算廓清指数(IK)∶IK=(logD2-logD12)/(t12-t2)(D2、D12分别为2min、12min时的吸光度，t12、t2分别为时间12min、2min)。　　16牛大力对免疫低下小鼠免疫器官质量的影响[4]取KM小鼠60只，随机分为5组：空白组，模型组，牛大力高、中、低剂量组，给药剂量同14项下。除空白组外，其他各组小鼠上午灌胃给予40mg·kg-1·d-1醋酸泼尼松，空白组给予等容积的蒸馏水，下午牛大力组小鼠灌胃给予相应药物，空白组和模型组灌服等容积的蒸馏水，连续12d。末次给药1h后，处死小鼠，按14项下方法计算脾

7、脏指数与胸腺指数。　　17牛大力对免疫低下小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响[4-5]分组及给药方法同16项下。按15项下方法检测IK。　　18牛大力对鸡红细胞致小鼠血清溶血素抗体形成的影响[6]在鸡血中加入5倍体积的灭菌Alsever溶液，离心洗涤，用生理盐水配成体积分数5%生理盐水鸡红细胞混悬液。补体的制备：将2只豚鼠心脏采血，离心后分离血清，用10倍生理盐水稀释。取KM小鼠72只，随机分为6组：空白组，模型组，醋酸泼尼松组(剂量为40mg·kg-1·d-1)，牛大力高、中、低剂量组(给药剂量同14项下)。除空白组外，各组小鼠先腹腔注

8、射体积分数5%生理盐水鸡红细胞混悬液02mL进行免疫，然后灌胃给药1次，连续12d。末次给药后1h，眼眶静脉取血，3000r/min离心10min，