用SCGE分析MTX对小鼠体内多个组织器官DNA损伤作用的研究

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1、山西医科大学硕士学位论文用SCGE分析MTX对小鼠体内多个组织器官DNA损伤作用的研究姓名：彭芸申请学位级别：硕士专业：遗传学指导教师：杨建一;宋玉兰2003.5.20山蕾r■：抖大掌硬士掌位·沦丈用SCGE分析MTX对小鼠体内多个组织器官DNA损伤作用的研究硕士研究生：彭芸导师：杨建一教授宋玉兰教授摘要单细胞凝胶电泳技术(sCGE)是近十几年来开展的一项检测有核细胞DNA损伤的新技术，在遗传毒理学和生物学监测等领域得到广泛应用。目前将该项技术应用于体内实验和临床用药检测已成为新的趋势。为了进一步了解甲氨蝶呤(MTX)的作用机制，探测其作用的遗传毒性靶器官，为应用MTX

2、治疗过程中的临床监测和副作用防治提供理论依据，我们以小鼠为研究对象，用单细胞凝胶电泳技术检测了MTX腹腔注射染毒1h、3h、6h、12h、24h后对肝、脾、骨髓、胸腺、肾、睾丸、胃和外周血淋巴细胞的DNA损伤作用及损伤程度与MTX剂量间的关系。实验结果：腹腔注射5mg／kgMTX后3h可诱发小鼠体内脾细胞、骨髓细胞、胸腺细胞和外周血淋巴细胞的DNA单链断裂且随时间延长损伤程度增大，于12h达到高峰，但末观察到对肝、肾、胃和睾丸细胞的罐山蕾r墨料大掌硬士掌位忱-文影响：核DNA损伤程度随着用药剂量的增大而增大。结论：MTX可致小鼠体内多脏器细胞的DNA单链断裂，不同脏器细

3、胞对MTX的易感性不同，脾、骨髓、胸腺、外周血淋巴细胞可能是MTX的遗传毒性靶细胞。提示，体内多器官的单细胞凝胶电泳分析对探测体内遗传毒性靶器官是十分有用的，外周血淋巴细胞在SCGE分析中的拖尾现象可作为用药后组织器官对药物敏感性反映的生物标志。关键词：甲氨喋呤DNA损伤靶器官单细胞凝胶电泳2兰!苎苎查竺!主竺苎竺查DetectionofDNAdamageinducedbyMTXinmultiplemouseorgans(1iver,spleen，bonemarrow，kidney，thymus，testis，stomachandperipherallymphocyte

4、s)usingtheSCGEassayMastergraduate：PengYunSupervisors：YangJianyi，ProfessorSongYulan，ProfessorAbstractInordertounderstandthemechanismofMTXfurtherandtoinvestigatethegenotoxictargetorgans，westudiedtheDNAdamageandthecorrelationwithdoseofMTXbyusingthealkalinesinglecellgelelectrophoresis(comet)

5、assay．Liver,spleen，bonemarrow，thymus，kidney，testicle，stomachandperipherallymphocytesofmicewereisolatedatlh，3h，6h，12h，24hafter5mg／kgMTXintraperitonealinjection．Theresultsshowedthat：SignificantincreaseinDNAmigrationandcometfrequencyinthespleen，thymus，bonemarrowandperipherallymphocyteswerei

6、nducedafterintraperitonealtreatmentofMTXatadoseof1．25-5mg／kg．NoobviousincreaseinDNAsinglestrandbreakswasobservedintheliver,kidney,3些!曼篓查竺!查竺苎兰查testicleandstomachofthemicewiththesametreatment．ThemigrationofnuclearDNAandcometfrequencyofspleen，thymus，bonemarrowandperipherallymphocytesinthed

7、ose—responsestudyshowedadose—dependentincrease．TheresultsindicatethatDNASSBscouldbeinducedbyMTXinsomecellsofmice．Therearedifferencesinsensitivityofvariousorgansinthemiceandcellsofspleen，thymus，bonemarrowandperipherallymphocytesmaybetheimportanttargetcellsofMTX．Multipleorg