当归中Z藁本内酯提取纯化及抗脑缺血作用研究

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1、Y$89807一一●1。*荣■———二———二．———出甑一⑨研究生学位论文当归中(z)一蓁本内酯提取纯化及抗脑缺血作用研究Ⅲ％§#g至撞生镕{#Ⅳ#g奎Z!左兹援十*$＆缉期．．壤土々n$#盎芒晶加苫皇贮鼍王强*女#*日蕈垫鲤生§县21自擘＆＆和期-垫堕生—且一中国海洋大学2、(z)一藁本内酯含量测定方法研究以邻苯二甲酸二乙酯为内标，利用毛细管柱气相色谱法对(z)．藁本内酯的含量测定方法进行了方法学研究。结果显示，(z)．藁本内酯在5．23～26．15mg／mL范围内呈良好的线形关系，回归方程为Y=O．8300X

2、+0．7893r=O．9999，平均回收率为98．96％，RSD=O．53％(n=5)。本研究为(z)．藁本内酯的含量测定提供了一种简单、灵敏、准确的方法。3、(Z)一藁本内酯提取工艺的研究3．1水蒸汽蒸馏、超临界CO。流体提取(z)一藁本内酯收率的比较比较了生产中几种提取方法对(z)一藁本内酯收率的影响。直接加热蒸馏可提取当归中总(z)一藁本内酯的67．2％，间接加热蒸馏仅提取当归中总(z)．藁本内酯的3．1％，超临界CO。流体提取可提取当归中总(z)．藁本内酯的90％。因而超临界C0。流体法对(Z)一藁本内酯的

3、提取更有优势。3．2水蒸汽蒸馏、超临界c仉流体对(z)一藁本内酯异构化的影响比较了直接加热蒸馏提取及超临界cO。流体提取对(z)一藁本内酯异构化的影响。超临界cO：流体由于其提取温度在45。C及惰性气体cO。环境下进行，很好的保障了(z)一藁本内酯的稳定性，而直接加热蒸馏提取则产生了很多新异构化物质，如3，4-二甲基苯甲醛、4一羟基一3一甲基乙酰苯、2，4，5一三甲基苯甲醛等。这些物质具体产生途径还有待于进一步研究。3．3水蒸汽蒸馏、超临界cO。流体提取所得(z)一藁本内酯稳定性比较利用气相色谱法比较了直接加热蒸馏

4、提取及超临界cO。流体提取的(z)一藁本内酯室温放置6个月的稳定性。直接加热蒸馏提取的(Z)一藁本内酯的面积归一化含量由87．09％降低到68．01％，而超临界c0。流体提取的(Z)一藁本内酯的面积归一化含量由80．20％提高到86．98％。超临界C02流体提取的(z)一藁本内酯稳定性较好，其百分含量提高的原因可能是由于提取物中(E)．藁本内酯的转化成(z)．藁本内酯所致。4、(Z)一藁本内酯抗脑缺血作用研究4．1(Z)一藁本内酯对实验性脑缺血损伤的保护作用采用大鼠全脑缺血模型(二血管阻断缺血模型)及局灶性脑缺血模

5、型(栓线法)分别对(z)一藁本内酯的抗脑缺血活性进行了研究。结果显示灌胃(Z)一藁本内酯(20、40mg／kg)可显著降低大鼠全脑缺血模型大脑皮层神经细胞核固缩率，显著降低大鼠局灶性脑缺血模型的运动功能障碍、脑缺血梗塞面积及动物脑水肿程度。提示(z)一藁本内酯具有抗脑缺血活性。经文献检索，目前还未发现相关(z)一藁本内酯抗脑缺血活性的报道。4．2(z)一藁本内酯对脑缺血大鼠海马组织血流的影响(z)一藁本内酯(20mg／kg、40mg／kg)可有效提高大鼠局灶性脑缺血模型海马组织血流。4．3(Z)一藁本内酯对犬离体基

6、底动脉血管舒张的作用(z)一藁本内酯对基底动脉血管条有明显的舒张作用。在20mg／L的浓度时，可显著降低去氧肾上腺素引起的基底动脉血管条的张力。4．4(z)一藁本内酯对ATP依赖性钾通道的影响(z)一藁本内酯对80mmol／LKCl导致的离体基底动脉血管条收缩无明显作用，而对30mmol／LKCI导致的血管条收缩有明显的舒张作用，这种舒张作用又可被ATP依赖性钾通道特异性抑制剂格列苯脲所抑制，提示(z)一藁本内酯对血管的舒张与ATP依赖性钾通道有关。4．5(z)一藁本内酯对神经元细胞钾通道电流的影的影响利用膜片钳技

7、术对神经元细胞钾电流研究结果表明，(z)一藁本内酯可显著提高神经元细胞钾电流，而这种作用又可被ATP依赖性钾通道特异性抑制剂列苯脲所抑制。证明(Z)一藁本内酯可激活神经细胞中ATP依赖性钾通道。关键词：(z)一藁本内酯；纯化；提取；脑缺血；AIR依赖性钾通道Studiesonextraction，purifioationandneuroprotectiveeffectof(Z)一IigusilidefromAnge／icasinensis(oliv．)DieIsAbstract如internationalmarke

8、t,Angelicasinensis(oliv．)Dielsisoneofthemostimportanttonicreme@fromchina．Thestudieson(Z)-ligustilideaboutpurification，determination，extractionandneuroprotectiveeffectwasinvestigate