肝硬化患者外周血TLR、CD14表达及其与内毒素血症的关系

《肝硬化患者外周血TLR、CD14表达及其与内毒素血症的关系》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、肝硬化患者外周血TLR、CD14表达及其与内毒素血症的关系作者：杨少奇王莉黄睿杨芝红杨力【摘要】目的探讨肝硬化患者外周血单个核细胞(PBMC)表面CD14、TOLL样受体(TLR2、TLR4)的表达情况及其与内毒素血症的关系。方法分别采用显色基质鲎试剂试管法和流式细胞术检测50例肝硬化患者和30例健康志愿者外周血内毒素浓度及PBMC表面CD14、TLR2、TLR4的表达。结果肝硬化患者外周血内毒素浓度及PBMC表面CD14、TLR2、TLR4的表达高于正常对照组(P<0.05);肝硬化合并腹水患者外周血内毒素浓度及PBMC表面CD14、TLR2、TL

2、R4的表达高于肝硬化无腹水患者(P<0.05);肝硬化患者外周血内毒素浓度与PBMC表面CD14、TLR2、TLR4的表达呈正相关(P<0.05)。结论肝硬化患者外周血内毒素浓度及PBMC表面CD14、TLR2、TLR4的表达均高于正常人，内毒素及内毒素受体CD14、TLR2、TLR4协同作用介导机体炎症反应，可能导致肝硬化患者病情进一步加重。【关键词】肝硬化;内毒素血症;Toll样受体内毒素血症是肝硬化患者发生严重并发症，甚至致死的重要原因之一，至今其预防和治疗效果不甚理想。内毒素的致病机制主要是依赖内毒素相关受体介导的，Toll受体2(TL

3、R2)、Toll受体4(TLR4)9、CDl4是现已发现的内毒素相关受体[1]。本研究通过检测肝硬化患者外周血血浆内毒素浓度及单个核细胞表面CD14、TLR2、TLR4的表达，进一步明确TLR的表达与内毒素血症的关系。　　1材料与方法　　1.1研究对象　　宁夏医科大学附属医院2008年12月1日-2009年3月1日收住院的乙肝肝硬化患者50例，其中男37例，女13例，年龄25-75岁，平均(50.62±14.16)岁。所有乙肝肝硬化患者病例均符合2000年西安会议《病毒性肝炎防治方案》的诊断标准[12]。肝功能分级采用Child-Pugh分级法，其中Chi

4、ld-PughA级28例，B级16例，C级6例。并将患者根据有无腹水分两组，其中肝硬化合并腹水者27例，无腹水者23例。　　同期随机选择30例健康人作为正常对照，其中男21例，女9例，年龄23～80岁，平均(52.26±14.46)岁。　　1.2标本来源9　　80例研究对象清晨空腹采集外周血3mL。其中2mL外周血注入抗凝管中，流式细胞技术检测备用;1mL外周血注入加有1mL血液抗凝剂的无热原试管中，制成二倍稀释液。离心取上清液待检内毒素浓度。　　1.3检测方法　　采用显色基质鲎试剂试管法检测内毒素浓度(东方鲎鲎试剂由厦门市鲎试剂实验厂有限公司生产);采用

5、流式细胞术检测PBMC表面TLR2、TLR4、CD14的表达(CD14抗体由美国BD公司生产，TLR2、TLR4检测试剂由美国eBioscience生产)，检测结果用平均荧光强度的几何均数表示。　　1.4统计学方法　　所有实验数据均由自动分析后获取，应用SPSS11.5统计学软件建立数据库并分析。计量资料参数采用均数±标准差表示;两样本均数比较采用t检验;多个样本均数比较采用方差分析;两变量关联性采用Pearson相关性分析。　　2结果　　2.1外周血内毒素浓度检测结果9　　经统计学处理，肝硬化患者外周血内毒素浓度(0.043±0.023)EU·mL-1显

6、著高于正常对照组(0.027±0.018)EU·mL-1(P<0.05);肝硬化合并腹水患者内毒素浓度(0.055±0.033)EU·mL-1显著高于肝硬化无腹水患者(0.030±0.020)EU·mL-1(P<0.05)。　　2.2BMC表面CD14、TLR2、TLR4的表达　　经过统计学处理，肝硬化患者PBMC表面CD14、TLR2、TLR4的表达显著高于正常对照组(P<0.05);肝硬化腹水患者PBMC表面CD14、TLR2、TLR4的表达显著高于肝硬化无腹水患者组(P<0.05);肝硬化无腹水患者组与正常对照组有升高趋势但差

7、异无统计学意义(P>0.05)，见表1(如图1-4，见封3)。表1各组间PBMC表面CD14、TLR2、TLR4的表达肝硬化组与对照组比较*P<0.05;腹水组与无腹水组比较#P<0.05。　　2.3外周血内毒素浓度与PBMC表面CD14、TLR2、TLR4表达的相关性9　　通过Pearson相关性分析，肝硬化患者外周血内毒素浓度、PBMC表面CD14、TLR2、TLR4的表达呈显著正相关性。内毒素浓度与CD14、TLR2、TLR4的表达呈正相关(r分别为0.369、0.461、0.521，P<0.05);CD14与TLR2、TLR

8、4呈正相关(r分别为0.481、0.498，P<0.05);